การเตรียมตัวอย่างสำหรับการวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยา การเก็บตัวอย่างน้ำเพื่อการวิจัยทางจุลชีววิทยา

1. บรรจุภัณฑ์ตัวอย่างได้รับการตรวจสอบและจับคู่กับคำจารึกบนภาพพิมพ์หินหรือบนฉลากที่ระบุในเอกสารแนบ

2. ทำความสะอาดบรรจุภัณฑ์พร้อมตัวอย่างจากการปนเปื้อน หากได้รับตัวอย่างผลิตภัณฑ์ที่ปิดผนึกอย่างผนึกแน่นเพื่อการวิเคราะห์ ให้ตรวจสอบความรัดกุมของภาชนะ ภาชนะแก้ว โลหะ หรือโพลีเมอร์ที่ปิดผนึกอย่างผนึกแน่นกับผลิตภัณฑ์ ล้างด้วยน้ำและผงซักฟอก จากนั้นล้างด้วยน้ำสะอาดและทำให้แห้ง บรรจุภัณฑ์ที่รั่วไหลของผลิตภัณฑ์ถูกเช็ดด้วยสำลีชุบเอทิลแอลกอฮอล์

3. การวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยาของตัวอย่างผลิตภัณฑ์ในลักษณะปกติจะดำเนินการในกล่องภายใต้สภาวะปลอดเชื้อ บรรจุภัณฑ์ของตัวอย่างผลิตภัณฑ์ที่มีลักษณะน่าสงสัยหรือเน่าเสียถูกเปิดในห้องแยกต่างหาก

4. ตัวอย่างที่มีผลิตภัณฑ์แช่แข็งจะถูกละลายที่อุณหภูมิ (4 ± 2) ° C ก่อนเตรียมตัวอย่าง จากนั้นให้เก็บตัวอย่างทันทีหลังจากละลาย แต่ไม่เกิน 18 ชั่วโมงต่อมา อนุญาตให้ละลายตัวอย่างผลิตภัณฑ์ได้ที่อุณหภูมิ 18-20 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 1 ชั่วโมง ตัวอย่างของผลิตภัณฑ์ที่มีความคงตัวเป็นเนื้อเดียวกันสามารถละลายในเทอร์โมสตัทที่อุณหภูมิ 35°C โดยมีเงื่อนไขว่าการละลายน้ำแข็งที่สมบูรณ์สามารถทำได้ในไม่ มากกว่า 15 นาที

5. การเปิดบรรจุภัณฑ์ด้วยตัวอย่างผลิตภัณฑ์

5.1. ทันทีก่อนเปิดบรรจุภัณฑ์พร้อมตัวอย่างผลิตภัณฑ์ในภาชนะสำหรับผู้บริโภค ผลิตภัณฑ์แบบไหลอิสระหรือแบบของเหลวจะถูกผสมด้วยการผกผันของภาชนะ 10 เท่าจากด้านล่างสู่ฝาหรือในลักษณะเป็นวงกลม

5.2. บรรจุภัณฑ์ที่มีตัวอย่างผลิตภัณฑ์ (ยกเว้นอาหารกระป๋อง) จะถูกเช็ดด้วยสำลีชุบด้วยเอทิลแอลกอฮอล์ 70% จากนั้นแอลกอฮอล์จะถูกลบออกโดยการระเหยอย่างอิสระ จากนั้นเปิดบรรจุภัณฑ์ ยิงคอของขวดโลหะหรือแก้ว และนำมวล (ปริมาตร) ของผลิตภัณฑ์มาในปริมาณที่จำเป็นในการเตรียมตัวอย่างอย่างน้อยหนึ่งตัวอย่าง

5.3 เปิดบรรจุภัณฑ์ที่มีตัวอย่าง (ถุงที่ทำด้วยฟอยล์ วัสดุโพลีเมอร์ หรือกระดาษ) ในสถานที่ที่บำบัดด้วยไม้กวาดชุบแอลกอฮอล์ก่อนหน้านี้ การเปิดบรรจุภัณฑ์พร้อมตัวอย่างผลิตภัณฑ์จะดำเนินการในลักษณะที่ไม่รวมถึงการปนเปื้อนของผลิตภัณฑ์และวัตถุโดยรอบ

พื้นผิวของอาหารกระป๋องที่มีลักษณะปกติจะได้รับการบำบัดด้วยเอทิลแอลกอฮอล์ด้วยวิธีใดวิธีหนึ่งดังต่อไปนี้:

เช็ดพื้นผิวของฝาด้วยผ้าเช็ดล้างแอลกอฮอล์, สำลีทิ้งไว้บนพื้นผิวและจุดไฟก่อนเปิดอาหารกระป๋อง

ฝาครอบยางและฝาครอบมงกุฎ เบเคไลต์ และฝาปิดพลาสติกได้รับการปฏิบัติในลักษณะเดียวกัน แต่ผ้าอนามัยแบบสอดไม่ติดไฟ

ฝาครอบโลหะ (ปลาย) ขึ้นอยู่กับวัตถุประสงค์ของการวิเคราะห์ ถูกเปิดหรือเจาะด้วยหมัด 1-4 ครั้งในบริเวณใกล้เคียงกับไม้กวาดที่กำลังลุกไหม้ ขนาดของรู (เส้นผ่านศูนย์กลางหรือความยาว) ควรอยู่ที่ 1-3 ซม.

5.4. ส่วนที่ชั่งน้ำหนักที่เลือกของผลิตภัณฑ์จะถูกหว่านทันทีในอาหารเลี้ยงเชื้อหรือถ่ายโอนไปยังสารละลายเกลือเปปโตนเพื่อเตรียมการเจือจาง

ก่อนเปิดขวดหรือหลอดที่มีฝาเกลียว ให้คลายเกลียวฝาหรือบุชที่เสร็จแล้วออก ขอบขวดหรือเยื่อของหลอดถูกเผาด้วยเปลวไฟ เมมเบรนถูกเจาะด้วยมีดผ่าตัดที่ปลอดเชื้อ

ก่อนที่จะเปิดขวดที่ปิดสนิทด้วยเม็ดมะยมหรือจุกฟอยล์ ชัตเตอร์จะถูกยิงด้วยเปลวไฟของหัวเตา จุกไม้ก๊อกจะถูกลบออกด้วยกุญแจปลอดเชื้อ ขอบขวดจะถูกเผาอีกครั้งในเปลวไฟของเตา

เมื่อเปิดขวดที่มีฝาปิดด้วยยาง ฝาปิดที่เคลือบด้วยเอทิลแอลกอฮอล์จะถูกลบออกโดยไม่ต้องทำการยิงเบื้องต้น และขอบของขวดจะถูกเผาด้วยเปลวไฟจากเตา

5.5. อาหารกระป๋องที่มีลักษณะชำรุดจะถูกวางบนถาดโลหะ ทันทีก่อนที่จะเก็บตัวอย่างผลิตภัณฑ์ พื้นผิวของฝา (ส่วนท้าย) จะได้รับการบำบัดตามลักษณะที่ระบุในย่อหน้าที่ 5.2 แต่เอทิลแอลกอฮอล์จะไม่จุดไฟ ฝาปิดที่ผ่านการบำบัด (หรือปลาย) ถูกปกคลุมด้วยกรวยโลหะปลอดเชื้อแบบคว่ำเพื่อให้ช่องทางครอบคลุมพื้นผิวอย่างสมบูรณ์ ผ่านช่องเปิดแคบ ๆ ของกรวยเจาะฝา (ปลาย) อย่างระมัดระวังด้วยหมัดที่ปลอดเชื้อทำให้เกิดรูเข็ม

อนุญาตให้ใช้ถุงพลาสติกแทนกรวยโลหะ หลังจากแปรรูปฝา (ส่วนปลาย) อาหารกระป๋องจะถูกใส่ในถุงพลาสติกที่เช็ดด้วยเอทิลแอลกอฮอล์ก่อนหน้านี้ เพื่อให้ก้นถุงปิดพื้นผิวที่จะเปิดออก กระเป๋าถูกมัดแน่นที่ด้านล่าง อย่างระมัดระวังด้วยแรงกดเบา ๆ ของหมัดจะทำรูพร้อมกันในฝากระป๋องและในถุงพลาสติกที่กดอย่างแน่นหนา

หลังจากที่ก๊าซและผลิตภัณฑ์หยุดหนีออกจากกระป๋องพร้อมกับผลิตภัณฑ์ ช่องทางและถุงจะถูกลบออก ฝาถูกเช็ดอีกครั้งด้วยไม้กวาดปลอดเชื้อ รูขยายด้วยหมัด และตัวอย่างของผลิตภัณฑ์จะถูกนำออกจากถังทันที กระป๋องสำหรับหว่านหรือเตรียมการเจือจาง

6. การสุ่มตัวอย่างและการเตรียมการเจือจางเบื้องต้น

6.1 ขึ้นอยู่กับพารามิเตอร์ที่จะกำหนด หนึ่งหรือหลายส่วนหนึ่งจะถูกนำมาจากแต่ละตัวอย่างของผลิตภัณฑ์เพื่อเตรียมการเจือจางและ/หรือการฉีดวัคซีนในอาหารเลี้ยงเชื้อ

6.2. มวล (ปริมาตร) ของตัวอย่างที่มุ่งหมายสำหรับการหว่านลงในอาหารเลี้ยงเชื้อและ/หรือสำหรับการเตรียมการเจือจางต้องกำหนดไว้ในเอกสารด้านกฎระเบียบและทางเทคนิคสำหรับผลิตภัณฑ์บางประเภทหรือวิธีการวิเคราะห์ แต่อย่างน้อย 10 ± 0.1 กรัม (ซม. 3)

6.3. ตัวอย่างสำหรับการหว่านโดยใช้น้ำหนักหรือวิธีปริมาตรทันทีหลังจากเปิดตัวอย่างผลิตภัณฑ์ การเปิดดำเนินการภายใต้สภาวะที่ไม่รวมการปนเปื้อนของผลิตภัณฑ์จากจุลินทรีย์ในบริเวณใกล้เคียงกับเปลวไฟของเตาเผาด้วยเครื่องมือที่ปราศจากเชื้อ

6.4. ตัวอย่างของผลิตภัณฑ์ถูกเลือกเพื่อให้มีส่วนประกอบทั้งหมดและอยู่ในอัตราส่วนเดียวกับในตัวอย่างที่วิเคราะห์

6.5. ในการเตรียมการเจือจางของตัวอย่างผลิตภัณฑ์จะใช้สารละลายเปปโตน-เกลือ อัตราส่วนระหว่างมวล (ปริมาตร) ของตัวอย่างผลิตภัณฑ์กับปริมาตรของสารละลายเปปโตน-เกลือสำหรับการเจือจางครั้งแรกและการเจือจางที่ตามมาคือ:

1: 9 - สำหรับการเจือจาง 10 เท่า (สำหรับผลิตภัณฑ์ที่มีไขมันจำนวนมากโดยไม่มีสารลดแรงตึงผิว 1:10)

1:5 - สำหรับการเจือจาง 6 เท่า

1:3 - สำหรับการเจือจาง 4 เท่า

1:1 - สำหรับการเจือจาง 2 เท่า

หากจำเป็นต้องเจือจางตัวอย่างผลิตภัณฑ์ที่มีไขมันจำนวนมาก อนุญาตให้ใช้สารลดแรงตึงผิว (โซเดียมไบคาร์บอเนต ฯลฯ) ที่ไม่มีฤทธิ์ต้านจุลชีพ

ในการเตรียมการเจือจางของผลิตภัณฑ์ตัวอย่างที่มีแรงดันออสโมติกสูง อนุญาตให้ใช้เปปโตนหรือน้ำกลั่น

6.6. การเจือจางเบื้องต้นของตัวอย่างผลิตภัณฑ์จัดทำขึ้นภายใต้สภาวะปลอดเชื้อด้วยวิธีใดวิธีหนึ่งดังต่อไปนี้:

การละลายของผลิตภัณฑ์

การเจือจางของผลิตภัณฑ์ที่มีเฟสของเหลว

ผงแขวนลอย ผลิตภัณฑ์จากแป้งเปียก และชิ้นผลิตภัณฑ์ที่ปนเปื้อนจุลินทรีย์ การทำให้เป็นเนื้อเดียวกันของผลิตภัณฑ์ที่เป็นของแข็ง

6.7. ตัวอย่างของผลิตภัณฑ์ที่เป็นของเหลวและหนืดจะถูกถ่ายด้วยปิเปตที่ปราศจากเชื้อโดยใช้ปลั๊กแบบฝ้ายโดยการใส่ปิเปตเข้าไปในส่วนลึกของผลิตภัณฑ์

ส่วนของผลิตภัณฑ์ที่เหลืออยู่บนพื้นผิวของปิเปตสามารถระบายไปที่ปลายปิเปตได้ ผลลัพธ์ที่ได้จะถูกลบออกโดยการสัมผัสผนังด้านในของจานหรือภาชนะสำหรับผู้บริโภคเหนือพื้นผิวของผลิตภัณฑ์

ผลิตภัณฑ์ที่มีความหนืดจะถูกลบออกจากพื้นผิวของปิเปตด้วยผ้าเช็ดทำความสะอาด

ส่วนหนึ่งของผลิตภัณฑ์จะถูกถ่ายโอนไปยังภาชนะที่มีสารละลายเปปโตน-น้ำเกลือเพื่อเตรียมการเจือจางเบื้องต้น เพื่อไม่ให้ปิเปตสัมผัสกับพื้นผิวของสารละลายเปปโตน-น้ำเกลือ ด้วยปิเปตที่ปราศจากเชื้ออื่น ให้ผสมผลิตภัณฑ์กับสารละลายเปปโตน-เกลือให้ละเอียดโดยเติมสิบเท่าและขับส่วนผสมออก

เมื่อทำงานกับผลิตภัณฑ์ที่มีความหนืด แนะนำให้วางลูกบอลแก้วหลายลูกในภาชนะเพื่อให้ผสมกับสารละลายเปปโตน-เกลือได้เร็วขึ้น

6.8. ผลิตภัณฑ์ของเหลวที่อิ่มตัวด้วยคาร์บอนไดออกไซด์ (CO 2 ) จะถูกถ่ายโอนไปยังขวดทรงกรวยที่ปิดด้วยผ้าฝ้ายหรือภาชนะอื่น ๆ ที่ผ่านการฆ่าเชื้อแล้วและให้ความร้อนด้วยการกวนบ่อย ๆ เป็นวงกลมในอ่างน้ำที่อุณหภูมิ 30 ถึง 37 ° C จนกว่าจะไม่มี ฟองแก๊สจะออกมามากขึ้น

ตัวอย่างผลิตภัณฑ์ถูกนำและประมวลผลตามข้อ 6.7

6.9. ตัวอย่างของผลิตภัณฑ์ที่เป็นผงหรือเป็นกลุ่มให้ใช้ช้อนหรือไม้พายปลอดเชื้อจากที่ต่างๆ ของผลิตภัณฑ์ (หากจำเป็น ให้เอาชั้นบนสุดของผลิตภัณฑ์ 2 ซม. ออกด้วยช้อนที่ปราศจากเชื้อก่อนทำการสุ่มตัวอย่าง) จากนั้นตัวอย่างจะถูกถ่ายโอนไปยัง ภาชนะปลอดเชื้อที่ชั่งน้ำหนักล่วงหน้าพร้อมฝาชั่งน้ำหนัก เติมสารละลายเปปโตน-เกลือลงในตัวอย่างในปริมาณที่จำเป็นเพื่อเตรียมการเจือจางเบื้องต้น กวนหรือเขย่าส่วนผสม 25 ครั้งในลักษณะเป็นวงกลมโดยมีรัศมี 30 ซม. จนได้ความสม่ำเสมอของผลิตภัณฑ์ที่เป็นเนื้อเดียวกัน

หากผลิตภัณฑ์ที่เป็นผงไม่ละลายในน้ำ หลังจากผสมกับสารละลายเกลือเปปโตนแล้ว สารแขวนลอยที่เป็นผลลัพธ์จะปล่อยให้แข็งตัวเป็นเวลา 10 นาที และเขย่าอีกครั้งอย่างแรงเป็นเวลา 1 นาที

6.10. ส่วนหนึ่งของตัวอย่างของผลิตภัณฑ์ที่บวมน้ำได้จะถูกนำไปและการเตรียมการเจือจางเบื้องต้นนั้นจัดทำขึ้นตามข้อกำหนดของเอกสารด้านกฎระเบียบและทางเทคนิคสำหรับผลิตภัณฑ์บางประเภท

6.11. ตัวอย่างของผลิตภัณฑ์ที่ละลายน้ำได้โดยใช้ไม้พายหรือช้อนหลังจากที่ถูกบด บด หรือบดภายใต้สภาวะปลอดเชื้อแล้วดำเนินการตามข้อ 6.9

ตัวอย่างจากตัวอย่างผลิตภัณฑ์ของแข็งที่ไม่ละลายน้ำจะถูกทำให้เป็นเนื้อเดียวกันในกรณีที่ระบุไว้ในเอกสารด้านกฎระเบียบและทางเทคนิค เมื่อทำให้ผลิตภัณฑ์เป็นเนื้อเดียวกันจำนวนรอบการหมุนของโฮโมจีไนเซอร์ควรเป็น 15-20 พันรอบ จำนวนรอบของโฮโมจีไนเซอร์ไม่ควรน้อยกว่า 8000 และมากกว่า 45,000 รอบต่อนาที

อนุญาตให้ทำให้ผลิตภัณฑ์ที่ไม่ผ่านการฆ่าเชื้อเป็นเนื้อเดียวกันได้โดยการบดจนกว่าจะได้ความสม่ำเสมอที่เป็นเนื้อเดียวกันในครกที่ปลอดเชื้อภายใต้สภาวะปลอดเชื้อ

6.12. ตัวอย่างของผลิตภัณฑ์แป้งเปียกจะนำมาหลังจากผสมกับช้อนหรือแท่งแก้วอย่างละเอียดแล้วนำไปแปรรูปตามข้อ 6.9

6.13. ตัวอย่างไขมันเหลวจะถูกถ่ายด้วยปิเปตที่อบอุ่นซึ่งให้ความร้อนโดยการจุดไฟ หลังจากเติมผลิตภัณฑ์ลงในปิเปตแล้ว ส่วนที่เหลือจะถูกลบออกจากพื้นผิวของปิเปตด้วยผ้าเช็ดทำความสะอาด

ผลิตภัณฑ์จากปิเปตถูกนำเข้ามาในจานที่มีจุกแก้วและเจือจางด้วยสารละลายเปปโตน-เกลือตามปริมาณที่ต้องการซึ่งให้ความร้อนที่อุณหภูมิ 40-45°C เมื่อตรวจพบจุลินทรีย์โรคจิตอุณหภูมิไม่ควรเกิน 37 ° C คราบไขมันที่เกาะติดกับปิเปตจะถูกชะล้างด้วยสารละลายเปปโตน-เกลือ ซึ่งถูกดูดหลายครั้งและปล่อยออกจากปิเปต

6.14. จะมีการเก็บตัวอย่างไขมันหลังจากตัดผลิตภัณฑ์ด้วยมีดหรือลวดเป็นหลายส่วน หากจำเป็น ให้เอาชั้นบนสุดออก

ตัวอย่างของผลิตภัณฑ์ถูกนำมาจากพื้นผิวของบาดแผลจากที่ต่าง ๆ ด้วยมีดผ่าตัดและถ่ายโอนไปยังจานชั่งน้ำหนักที่มีฝาปิด

ตัวอย่างจำนวนหนึ่งจะถูกถ่ายโอนไปยังจานปากกว้างที่มีจุกแก้วแบบพื้น ส่วนที่เหลือของไขมันที่เกาะติดกับผนังของจานจะถูกล้างในจานเดียวกันด้วยสารละลายเปปโตนและเกลือในปริมาณที่ร้อนถึง 40-45 ° C ซึ่งจะถูกเติมลงในจานในปริมาณที่จำเป็นเพื่อให้ได้การเจือจางเริ่มต้น

จากไขมันที่เป็นของแข็ง สามารถเลือกตัวอย่างตามปริมาตรได้ ไขมันละลายในจานที่มีคอกว้างในอ่างน้ำที่อุณหภูมิไม่เกิน 45 ° C เมื่อตรวจพบจุลินทรีย์โรคจิตอุณหภูมิไม่ควรเกิน 37 ° C

หลังจากผสมไขมันที่ละลายแล้ว ไขมันจะถูกถ่ายด้วยปิเปตอุ่นๆ ลงในจานคอกว้างที่มีฝาแก้วบดซึ่งมีสารละลายเปปโตน-เกลือในปริมาณที่ต้องการเพื่อเตรียมการเจือจางเบื้องต้น สารละลายเกลือเปปโทนถูกอุ่นที่อุณหภูมิ 40-45 องศาเซลเซียส เมื่อตรวจพบจุลินทรีย์ที่ออกฤทธิ์ต่อจิตได้สูงถึง 37°C

6.15. ตัวอย่างจากตัวอย่างผลิตภัณฑ์วิปปิ้งหรือความเหนียวข้นที่มีไขมันจำนวนมากหลังจากผสมกับแท่งแก้วแล้วนำช้อนลงในจานชั่งน้ำหนักและเติมสารละลายเปปโตน - เกลือให้ความร้อนที่อุณหภูมิ 40-45 ° C ในปริมาณที่จำเป็นในการเตรียมการเจือจางเบื้องต้น

6.16. การหาค่าการปนเปื้อนของจุลินทรีย์บนพื้นผิวของตัวอย่างผลิตภัณฑ์ทำได้โดยการล้างด้วยสำลีก้าน

สำลีก้านที่ผ่านการฆ่าเชื้อแล้วชุบด้วยสารละลายเปปโตน-เกลือ และเช็ดด้วยจุดต่างๆ บนพื้นผิวของชิ้นส่วนต่างๆ ของผลิตภัณฑ์ที่วิเคราะห์โดยมีพื้นที่รวม 100 ซม. 2 .

พื้นที่ผิวที่จะวิเคราะห์วัดโดยใช้แม่แบบปลอดเชื้อที่มีรูขนาดที่เหมาะสม

วางไม้กวาดในภาชนะที่มีสารละลายเปปโตน-เกลืออย่างน้อย 100 ซม. 3 จานปิดด้วยจุกยางและเขย่าจนไม้กวาดแตกตัวเป็นเส้นใยแต่ละเส้น สารแขวนลอยที่เกิดขึ้นถือเป็นการเจือจางดั้งเดิม

7. การเตรียมการเจือจางสิบเท่า

7.1. การเจือจางสิบเท่าครั้งแรกของตัวอย่างคือตัวอย่างเริ่มต้น การเจือจางเริ่มต้นถูกจัดทำขึ้นตามวรรค 6 การเจือจางที่ตามมาจะได้มาจากมัน

7.2. การเจือจางครั้งที่สองที่ตามมานั้นเตรียมจากส่วนหนึ่งของการเจือจางดั้งเดิมและเก้าส่วนของสารละลายเปปโตน-น้ำเกลือโดยการผสมในหลอดทดลอง

หากใช้ปิเปตเพื่อผสมการเจือจางเริ่มต้น ให้ใช้ปิเปตเดียวกันเพื่อเพิ่มการเจือจางเริ่มต้น 1 ซม. 3 ลงในสารละลายเปปโตน-เกลือ 9 ซม. 3 โดยไม่ต้องสัมผัสพื้นผิวของสารละลายด้วยปิเปต การเจือจางผสมกับปิเปตอื่นโดยการดูดและเป่าเนื้อหาของหลอดออกสิบครั้ง

7.3. การเจือจางครั้งที่สามและการเจือจางที่ตามมานั้นจัดทำขึ้นในลักษณะเดียวกัน

7.4. ช่วงเวลาระหว่างการเตรียมส่วนที่ชั่งน้ำหนักของผลิตภัณฑ์ การเจือจาง และการหว่านในสารอาหารไม่ควรเกิน 30 นาที

การสุ่มตัวอย่างเพื่อการวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยา

ก่อนทำการสุ่มตัวอย่าง ให้สังเกตลักษณะที่ปรากฏของหน่วยบรรจุภัณฑ์ด้วยสายตา

จะมีการเก็บตัวอย่างผลิตภัณฑ์สำหรับการวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยาก่อนสุ่มตัวอย่างสำหรับการวิเคราะห์ทางเคมีกายภาพและทางประสาทสัมผัส

ตัวอย่างผลิตภัณฑ์สำหรับการวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยาถูกนำไปใส่ในภาชนะที่ปลอดเชื้อ โดยที่ลำคอจะถูกเผาในเบื้องต้นด้วยเปลวไฟจากเตา สุ่มตัวอย่างโดยใช้เครื่องมือที่ปราศจากเชื้อ

แต่ละขวดที่มีตัวอย่างจะมีฉลากกำกับไว้ ซึ่งควรระบุ: ชื่อของผู้ผลิต, ชื่อของเบียร์, วันที่บรรจุขวด, วันที่สุ่มตัวอย่าง, ปริมาณเบียร์ที่ใช้เก็บตัวอย่าง, ชื่อ และตำแหน่งของผู้เก็บตัวอย่าง

ก่อนการวิเคราะห์ ควรเก็บขวดตัวอย่างไว้ที่อุณหภูมิ 0 ถึง 5 ° C ไม่เกิน 24 ชั่วโมง

การเตรียมตัวอย่างสำหรับการวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยา

บรรจุภัณฑ์ตัวอย่างได้รับการตรวจสอบและจับคู่กับคำจารึกบนการพิมพ์หินหรือฉลากที่ระบุในเอกสารแนบ

บรรจุภัณฑ์ที่มีตัวอย่างจะทำความสะอาดสิ่งปนเปื้อน หากได้รับตัวอย่างผลิตภัณฑ์ที่ปิดผนึกอย่างผนึกแน่นเพื่อการวิเคราะห์ ให้ตรวจสอบความรัดกุมของภาชนะ

การวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยาของตัวอย่างที่มีลักษณะปกติของผลิตภัณฑ์จะดำเนินการในกล่องภายใต้สภาวะปลอดเชื้อ

ก่อนเก็บตัวอย่างเครื่องดื่มที่เสร็จแล้ว ให้เช็ดจุกและคอขวด พื้นผิวของกระป๋องโลหะ หรือบรรจุภัณฑ์อื่นๆ ด้วยสำลีก้านจุ่มในสารละลายเอทานอล 70% จากนั้นจุกรากจะถูกลบออกอย่างรวดเร็วด้วยประแจที่ปลอดเชื้อหรือคลายเกลียวฝาขวด คอขวดที่เปิดอยู่ถูกเผาในเปลวไฟของตะเกียงแอลกอฮอล์หรือเช็ดด้วยสารละลายเอทิลแอลกอฮอล์ 70% และนำปริมาตรของเครื่องดื่มที่จำเป็นสำหรับการวิเคราะห์มา (30712)

การเพาะด้วยแผ่นกรองเมมเบรน

เบียร์ 100 มล. จากแต่ละบรรจุภัณฑ์จะถูกส่งผ่านตัวกรองเมมเบรนที่มีเส้นผ่านศูนย์กลางรูพรุน 0.45 นาโนเมตร ตัวกรองจะถูกล้างด้วยน้ำกลั่นที่ปราศจากเชื้อเพื่อขจัดเศษเบียร์ออก ตัดเป็น 2 ส่วน โดยแต่ละครึ่งวางบนจานเพาะเชื้อที่มีเส้นผ่านศูนย์กลาง 5 ซม. เติมล่วงหน้าด้วยวุ้นสาโทหรือวุ้นเบียร์อเนกประสงค์ ครึ่งหนึ่งของตัวกรองถูกวางไว้ในสภาวะไร้อากาศเป็นเวลา 11 วันที่อุณหภูมิ 25 ° C อีกครึ่งหนึ่งอยู่ในสภาวะแอโรบิกเป็นเวลา 3 วันที่อุณหภูมิ 25 ° C อาณานิคมที่ปลูกจะแบ่งออกเป็นแบคทีเรีย ยีสต์ รา แบคทีเรียต้องผ่านการทดสอบ catalase เพื่อแยกแลคโตบาซิลลัสและ pediococci ผลลัพธ์ที่ได้ในแต่ละครึ่งของตัวกรองจะถูกคูณด้วยสองเพื่อให้ได้ผลรวม 100 มล.

การกำหนดจำนวนจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และ facultative

วิธีการนี้ขึ้นอยู่กับการเพาะเชื้อของผลิตภัณฑ์ในอาหารเลี้ยงเชื้อวุ้น การฟักไข่ และการนับจำนวนโคโลนีที่มองเห็นได้ทั้งหมด

เมื่อกำหนดจำนวนจุลินทรีย์โดยการฉีดวัคซีนในอาหารเลี้ยงเชื้อวุ้นจากผลิตภัณฑ์ 1 ซม. 3 จะถูกหว่านในจานเพาะเชื้อสองจานคู่ขนานกัน พืชถูกเทด้วยสารอาหารที่ละลายและทำให้เย็นลงถึง 45-48 0 С

เพาะเชื้อที่อุณหภูมิ (30 ± 1) °C เป็นเวลา (72 ± 3) ชั่วโมง จานเพาะเชื้อที่มีการเพาะเชื้อจะกระจายอยู่ในตัวควบคุมอุณหภูมิเพื่อให้ระยะห่างระหว่างกองจานกับผนังของตัวควบคุมอุณหภูมิเป็นอย่างน้อย 3 ซม.

จานเพาะเชื้อแต่ละจานนับจำนวนโคโลนีที่โตแล้ว โดยวางคว่ำบนพื้นหลังสีเข้ม โดยใช้แว่นขยายขยาย 4-10 เท่า แต่ละอาณานิคมที่นับจะถูกทำเครื่องหมายที่ด้านล่างของจานด้วยหมึก สำหรับการนับจานจะถูกเลือกซึ่งมีการเติบโตตั้งแต่ 15 ถึง 300 อาณานิคม

ด้วยโคโลนีจำนวนมากและการกระจายแบบสม่ำเสมอ ส่วนล่างของจานเพาะเชื้อแบ่งออกเป็น 4 ส่วนหรือมากกว่าที่เหมือนกัน นับโคโลนีอย่างหมดจดใน 2-3 ส่วน (แต่ไม่น้อยกว่า 13 ของพื้นผิวของจาน) หาค่าเฉลี่ยเลขคณิตของจำนวนอาณานิคมและคูณด้วยจำนวนภาคทั้งหมดของถ้วยทั้งหมด ดังนั้น จงหาจำนวนโคโลนีทั้งหมดในพืชผลที่มีการเจือจางเพียงครั้งเดียว

จำนวนจุลินทรีย์ใน 1.0 กรัม (ซม. 3) ของผลิตภัณฑ์ M คำนวณโดยสูตร: M=NchmCHS โดยที่ N คือระดับของการเจือจางตัวอย่าง m คือจำนวนหัวเชื้อที่เติมลงในจานเพาะเชื้อ cm 3 ; C คือค่าเฉลี่ยเลขคณิตปัดเศษของจำนวนโคโลนี

จำนวนของจุลินทรีย์แอโรบิกแบบมีโซฟิลิกและแบบไม่ใช้ออกซิเจนเชิงคณะ (QMAFAnM) แสดงเป็น CFU/cm 3 หรือ CFU/g, CFU คือหน่วยที่ก่อตัวเป็นโคโลนี

GOST 26669-85

มาตรฐานอินเตอร์สเตท

อาหารและชิมผลิตภัณฑ์

การเตรียมตัวอย่างสำหรับจุลชีววิทยา
วิเคราะห์

วันที่แนะนำ 01.07.86

มาตรฐานสากลนี้ใช้กับผลิตภัณฑ์อาหารและกลิ่นรส และระบุการจัดเตรียมตัวอย่างสำหรับการวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยา

คำศัพท์ที่ใช้ในมาตรฐานและคำอธิบายมีอยู่ในภาคผนวก

1. อุปกรณ์ รีเอเจนต์ และวัสดุ

อุปกรณ์กรองเมมเบรน เตาแก๊สหรือแอลกอฮอล์ตาม GOST 25336;

กรวยโลหะ ต่อย;

ที่เปิดขวด; ที่เปิดกระป๋อง;

กรรไกร, มีดผ่าตัด, แหนบตาม GOST 21241, ไม้พาย, ช้อน;

ลายฉลุ (แม่แบบ); หลอดทดลองตาม GOST 25336;

* ในอาณาเขตของสหพันธรัฐรัสเซีย GOST R 51652-2000 นั้นใช้ได้

70%; ถุงพลาสติก; ผงซักฟอก;

เปปโตนสำหรับวัตถุประสงค์ทางแบคทีเรียตาม GOST 13805

เครื่องมือและพื้นผิวของอุปกรณ์ที่สัมผัสโดยตรงกับผลิตภัณฑ์จะต้องผ่านการฆ่าเชื้อด้วยวิธีใดวิธีหนึ่งที่ระบุใน GOST 26668

1.2. การเตรียมสารละลายเปปโตน-เกลือ

สารละลายเกลือเปปโทนเตรียมดังนี้: โซเดียมคลอไรด์ 8.5 กรัมและเปปโทน 1.0 กรัมละลายในน้ำกลั่น 1 dm 3 ด้วยความร้อนช้า สารละลายที่เป็นผลลัพธ์ หากจำเป็น จะถูกกรองผ่านตัวกรองกระดาษ ปรับเป็น pH 7.0 ± 0.1 เทลงในขวด หลอดทดลอง หรือภาชนะอื่นๆ ปิดผนึกและฆ่าเชื้อที่อุณหภูมิ (121 ± 1) °C เป็นเวลา 30 นาที

สารละลายถูกเก็บไว้ในที่มืดที่อุณหภูมิ (4 ± 2) °C เป็นเวลาไม่เกิน 30 วันภายใต้สภาวะที่ไม่รวมถึงการระเหยของความชื้น

อุณหภูมิของสารละลายเปปโตน-เกลือควรสอดคล้องกับอุณหภูมิของผลิตภัณฑ์ที่วิเคราะห์

1.3. การเตรียมน้ำเปปโตน

น้ำเปปโตนถูกเตรียมในลักษณะเดียวกับสารละลายเปปโตน-น้ำเกลือโดยไม่ต้องเติมโซเดียมคลอไรด์

2. การเตรียมตัวอย่างเพื่อการวิเคราะห์

2.1. บรรจุภัณฑ์ตัวอย่างได้รับการตรวจสอบและจับคู่กับคำจารึกบนภาพพิมพ์หินหรือบนฉลากที่ระบุในเอกสารแนบ

2.3. การวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยาของตัวอย่างที่มีลักษณะปกติของผลิตภัณฑ์จะดำเนินการในกล่องภายใต้สภาวะปลอดเชื้อ บรรจุภัณฑ์ของตัวอย่างผลิตภัณฑ์ที่มีลักษณะน่าสงสัยหรือเน่าเสียถูกเปิดในห้องแยกต่างหาก

การเตรียมการชกมวยระบุไว้ในภาคผนวก

2.2, 2.3. (ฉบับแก้ไข ฉบับที่ 1).

2.4. ตัวอย่างที่มีผลิตภัณฑ์แช่แข็งจะถูกละลายที่อุณหภูมิ (4 ± 2) °C ก่อนชั่งน้ำหนัก เก็บตัวอย่างทันทีหลังจากละลาย แต่ไม่เกิน 18 ชั่วโมงหลังจากเริ่มละลาย

อนุญาตให้ละลายตัวอย่างผลิตภัณฑ์ที่อุณหภูมิ 18 - 20 ° C เป็นเวลา 1 ชั่วโมง

ตัวอย่างของผลิตภัณฑ์ที่มีความคงตัวที่เป็นเนื้อเดียวกันอาจละลายในเทอร์โมสตัทที่ 35 °C โดยมีเงื่อนไขว่าสามารถละลายน้ำแข็งได้อย่างสมบูรณ์ภายในเวลาไม่เกิน 15 นาที

2.5. การเปิดบรรจุภัณฑ์ด้วยตัวอย่างสินค้า

2.5.1. ทันทีก่อนเปิดบรรจุภัณฑ์พร้อมตัวอย่างผลิตภัณฑ์ในภาชนะสำหรับผู้บริโภค แบบไหลอิสระหรือมีเฟสของเหลว ให้ผสมโดยผกผันภาชนะ 10 เท่าจากด้านล่างสู่ฝาหรือในลักษณะเป็นวงกลม

2.6.1. จากแต่ละตัวอย่างของผลิตภัณฑ์ ขึ้นอยู่กับตัวบ่งชี้ที่จะกำหนด ส่วนหนึ่งหรือหลายส่วนจะถูกนำมาเพื่อเตรียมการเจือจางและ/หรือการฉีดวัคซีนในอาหารเลี้ยงเชื้อ

2.6.2. มวล (ปริมาตร) ของตัวอย่างที่มุ่งหมายสำหรับการหว่านลงในอาหารเลี้ยงเชื้อและ/หรือสำหรับการเตรียมการเจือจางต้องกำหนดไว้ในเอกสารด้านกฎระเบียบและทางเทคนิคสำหรับผลิตภัณฑ์บางประเภทหรือวิธีการวิเคราะห์

2.6.3. ตัวอย่างสำหรับการหว่านโดยใช้น้ำหนักหรือวิธีปริมาตรทันทีหลังจากเปิดตัวอย่างผลิตภัณฑ์ การเปิดดำเนินการภายใต้สภาวะที่ไม่รวมการปนเปื้อนของผลิตภัณฑ์จากจุลินทรีย์ในบริเวณใกล้เคียงกับเปลวไฟของเตาเผาด้วยเครื่องมือที่ปราศจากเชื้อ

2.6.4. ตัวอย่างของผลิตภัณฑ์ถูกเลือกเพื่อให้มีส่วนประกอบทั้งหมดและอยู่ในอัตราส่วนเดียวกับในตัวอย่างที่วิเคราะห์

2.6.5. ในการเตรียมการเจือจางของตัวอย่างผลิตภัณฑ์จะใช้สารละลายเปปโตน-เกลือ

อนุญาตให้เตรียมการเจือจางเริ่มต้นของผลิตภัณฑ์ที่มีสัดส่วนมวลของ NaCl มากกว่า 5% โดยใช้น้ำเปปโตน การเจือจางเบื้องต้นของเนื้อสัตว์ ปลา และผลิตภัณฑ์จากนมโดยใช้น้ำเกลือ

มวล (ปริมาตร) ของตัวอย่างผลิตภัณฑ์ที่มีไว้สำหรับการเตรียมการเจือจางเริ่มต้นหรือโฮโมจีเนตต้องมีอย่างน้อย (10 ± 0.1) ก./ซม. 3

อัตราส่วนระหว่างมวล (ปริมาตร) ของตัวอย่างผลิตภัณฑ์กับปริมาตรของสารละลายเปปโตน-เกลือสำหรับการเจือจางครั้งแรกและการเจือจางที่ตามมาคือ:

1:9 - สำหรับการเจือจาง 10 เท่า (สำหรับผลิตภัณฑ์ที่มีไขมันจำนวนมากโดยไม่มีสารลดแรงตึงผิว 1:10)

1:5 - สำหรับการเจือจาง 6 เท่า

1:3 - สำหรับการเจือจาง 4 เท่า

1:1 - สำหรับการเจือจาง 2 เท่า

(ฉบับแก้ไข ฉบับที่ 1)

2.6.6. การเจือจางเบื้องต้นของตัวอย่างผลิตภัณฑ์จัดทำขึ้นภายใต้สภาวะปลอดเชื้อด้วยวิธีใดวิธีหนึ่งดังต่อไปนี้:

การละลายของผลิตภัณฑ์

การเจือจางของผลิตภัณฑ์ที่มีเฟสของเหลว

สารแขวนลอยของผง ผลิตภัณฑ์จากแป้งเปียก และพื้นผิวของชิ้นผลิตภัณฑ์ที่ปนเปื้อนจุลินทรีย์

การทำให้เป็นเนื้อเดียวกันของผลิตภัณฑ์ที่เป็นของแข็ง

2.6.8. ผลิตภัณฑ์ของเหลวที่อิ่มตัวด้วยคาร์บอนไดออกไซด์ (CO 2 ) จะถูกถ่ายโอนไปยังขวดทรงกรวยที่ปิดด้วยผ้าฝ้ายหรือภาชนะอื่น ๆ ที่ผ่านการฆ่าเชื้อแล้วและให้ความร้อนด้วยการกวนบ่อย ๆ เป็นวงกลมในอ่างน้ำที่อุณหภูมิ 30 ถึง 37 ° C จนกว่าจะไม่มีอีกต่อไป ฟองแก๊สจะออกมา

ตัวอย่างผลิตภัณฑ์ถูกนำมาและประมวลผลตามหน้า

ตัวอย่างจากตัวอย่างผลิตภัณฑ์ของแข็งที่ไม่ละลายน้ำจะถูกทำให้เป็นเนื้อเดียวกันในกรณีที่ระบุไว้ในเอกสารด้านกฎระเบียบและทางเทคนิค เมื่อทำให้ผลิตภัณฑ์เป็นเนื้อเดียวกันจำนวนรอบการหมุนของโฮโมจีไนเซอร์ควรเป็น 15,000 - 20,000 รอบ จำนวนรอบของโฮโมจีไนเซอร์ไม่ควรน้อยกว่า 8000 และมากกว่า 45,000 รอบต่อนาที

หากได้มวลที่ต่างกันในระหว่างการทำให้เป็นเนื้อเดียวกันของผลิตภัณฑ์ ให้จับตัวกันเป็นเวลา 15 นาที และของเหลวเหนือตะกอนจะถูกใช้สำหรับการฉีดวัคซีนและ (หรือ) การเตรียมการเจือจาง

(ฉบับแก้ไข ฉบับที่ 1)

2.6.12. ตัวอย่างของผลิตภัณฑ์แป้งเปียกจะนำมาหลังจากผสมกับช้อนหรือแท่งแก้วอย่างละเอียดแล้วนำไปแปรรูปตามหน้า

ผลิตภัณฑ์จากปิเปตถูกนำเข้ามาในจานที่มีฝาปิดแก้วและเจือจางด้วยสารละลายเกลือเปปโตนในปริมาณที่ต้องการซึ่งให้ความร้อนที่อุณหภูมิ 40-45 °C เมื่อตรวจพบจุลินทรีย์โรคจิต อุณหภูมิไม่ควรเกิน 37 °C คราบไขมันที่เกาะติดกับปิเปตจะถูกชะล้างด้วยสารละลายเปปโตน-เกลือ ซึ่งถูกดูดหลายครั้งและปล่อยออกจากปิเปต

2.6.14. จะมีการเก็บตัวอย่างไขมันหลังจากตัดผลิตภัณฑ์ด้วยมีดหรือลวดเป็นหลายส่วน หากจำเป็น ให้เอาชั้นบนสุดออก

ตัวอย่างจำนวนหนึ่งจะถูกถ่ายโอนไปยังจานปากกว้างที่มีจุกแก้วแบบพื้น ส่วนที่เหลือของไขมันที่เกาะติดกับผนังของจานจะถูกล้างในจานเดียวกันด้วยสารละลายเปปโตน-เกลือจำนวนหนึ่งซึ่งให้ความร้อนที่อุณหภูมิ 40 - 45 ° C ซึ่งเติมลงในจานในปริมาณที่จำเป็นเพื่อให้ได้การเจือจางเริ่มต้น

จากไขมันที่เป็นของแข็ง สามารถเลือกตัวอย่างตามปริมาตรได้ ไขมันละลายในจานคอกว้างในอ่างน้ำที่อุณหภูมิไม่เกิน 45 ° C เมื่อตรวจพบจุลินทรีย์โรคจิต อุณหภูมิไม่ควรเกิน 37 °C

หลังจากผสมไขมันที่ละลายแล้ว ไขมันจะถูกถ่ายด้วยปิเปตอุ่นๆ ลงในจานคอกว้างที่มีฝาแก้วบดซึ่งมีสารละลายเปปโตน-เกลือในปริมาณที่ต้องการเพื่อเตรียมการเจือจางเบื้องต้น สารละลายเกลือเปปโทนถูกอุ่นที่อุณหภูมิ 40 - 45 °C; เมื่อตรวจพบจุลินทรีย์โรคจิตถึง 37 °C

2.6.15 ตัวอย่างจากตัวอย่างผลิตภัณฑ์วิปปิ้งหรือความเหนียวข้นที่มีไขมันปริมาณมากหลังจากผสมกับแท่งแก้วแล้ว นำช้อนใส่จานชั่งน้ำหนักและสารละลายเปปโตน-เกลือ ให้ความร้อนที่อุณหภูมิ 40 - 45 ° C จะถูกเติมในปริมาณที่จำเป็นเพื่อเตรียมการเจือจางเบื้องต้น

2.6.16 การหาค่าการปนเปื้อนของจุลินทรีย์บนพื้นผิวของตัวอย่างผลิตภัณฑ์ทำได้โดยการล้างด้วยสำลีก้าน

วางไม้กวาดในหลอดทดลองที่มีสารละลายเปปโตน-เกลือ 10 ซม. 3 เนื้อหาของหลอดจะถูกผสมอย่างทั่วถึงกับปิเปต สารแขวนลอยที่เกิดขึ้นถือเป็นการเจือจางดั้งเดิม

(ฉบับแก้ไข ฉบับที่ 1)

2.7. การเตรียมการเจือจางสิบเท่า

2.7.1. การเจือจางสิบเท่าครั้งแรกของตัวอย่างคือตัวอย่างเริ่มต้น การเจือจางเริ่มต้นถูกจัดทำขึ้นตาม p การเจือจางที่ตามมาจะได้มาจากมัน

2.7.2. การเจือจางครั้งที่สองที่ตามมานั้นเตรียมจากส่วนหนึ่งของการเจือจางดั้งเดิมและเก้าส่วนของสารละลายเปปโตน-น้ำเกลือโดยการผสมในหลอดทดลอง

2.7.3. การเจือจางครั้งที่สามและการเจือจางที่ตามมานั้นจัดทำขึ้นในลักษณะเดียวกัน

2.7.4. ช่วงเวลาระหว่างการเตรียมส่วนที่ชั่งน้ำหนักของผลิตภัณฑ์ การเจือจาง และการหว่านในสารอาหารไม่ควรเกิน 30 นาที

เอกสารแนบ 1
อ้างอิง

เงื่อนไขที่ใช้ในมาตรฐานและคำอธิบายของ IT

ภาคเรียน	คำอธิบาย
บานพับ	ส่วนหนึ่งของตัวอย่างของมวล ปริมาตร ที่มุ่งหมายสำหรับการเตรียมโฮโมจีเนต การเจือจางเบื้องต้น หรือการฉีดเชื้อโดยตรงไปยังอาหารเลี้ยงเชื้อ
การผสมพันธุ์เบื้องต้น	ตัวอย่างของผลิตภัณฑ์ เจือจางด้วยสารละลายตามความเข้มข้นที่ต้องการ ซึ่งอาจเป็นการเจือจางสอง - (2 -1) สี่ (4 -1) หก (6 -1) และบ่อยครั้งกว่าเป็นสิบเท่า (10 -1)
ความคงตัวทางจุลชีววิทยาของอาหารกระป๋อง	การปฏิบัติตามตัวชี้วัดคุณภาพของอาหารกระป๋องตามข้อกำหนดที่กำหนดโดยเอกสารด้านกฎระเบียบและทางเทคนิคสำหรับผลิตภัณฑ์ประเภทนี้ในแง่ของตัวชี้วัดทางจุลชีววิทยา
อาหารกระป๋องเต็มรูปแบบ	อาหารกระป๋อง ความคงตัวทางจุลชีววิทยาที่ไม่ขึ้นกับระยะเวลาการเก็บรักษาที่อุณหภูมิที่กำหนดไว้สำหรับผลิตภัณฑ์ประเภทนี้ในเอกสารด้านกฎระเบียบและทางเทคนิค
อุตสาหกรรมอาหารกระป๋องปลอดเชื้อ	ไม่มีผลิตภัณฑ์กระป๋องของจุลินทรีย์ที่สามารถพัฒนาได้ที่อุณหภูมิการเก็บรักษาที่กำหนดไว้สำหรับอาหารกระป๋องประเภทนี้ และของจุลินทรีย์และสารพิษจากจุลินทรีย์ที่เป็นอันตรายต่อสุขภาพของมนุษย์
ลักษณะปกติของอาหารกระป๋อง (ด้วยการประเมินคุณภาพทางจุลชีววิทยา)	อาหารกระป๋องที่ไม่มีข้อบกพร่องในด้านบรรจุภัณฑ์ การปิด และผลิตภัณฑ์กระป๋อง
ข้อบกพร่องของอาหารกระป๋อง	ความแตกต่างของแต่ละบุคคลระหว่างรูปลักษณ์ของอาหารกระป๋อง สถานะของบรรจุภัณฑ์หรือการปิด หรือคุณภาพของผลิตภัณฑ์กระป๋องตามข้อกำหนดของเอกสารด้านกฎระเบียบและทางเทคนิค
อาหารกระป๋องแบบมีปลายสั่น	อาหารกระป๋องในภาชนะที่ปลายด้านหนึ่งงอเมื่อกดกับปลายอีกด้าน แต่หลังจากความดันหยุดลงจะกลับสู่สภาพเดิมเช่นเดียวกับอาหารกระป๋องในภาชนะที่บวมอันเป็นผลมาจากการละเมิด ระบอบอุณหภูมิของการจัดเก็บ แต่ได้มาซึ่งลักษณะปกติที่อุณหภูมิห้อง
โคลพุชา	อาหารกระป๋องในภาชนะที่มีก้น (ฝา) บวมอย่างต่อเนื่องเพื่อให้ได้ตำแหน่งปกติ (ในกรณีนี้ปลายอีกด้านจะฟู) หลังจากถอดความดันออก ก้น (ฝา) จะกลับสู่สถานะบวมก่อนหน้า
อาหารกระป๋องระเบิด	อาหารกระป๋องในภาชนะที่บวมซึ่งไม่สามารถมีลักษณะปกติได้
การปิดผนึกอาหารกระป๋องอย่างแน่นหนา	สถานะของบรรจุภัณฑ์และการปิดฝา ซึ่งรับประกันการปกป้องอาหารกระป๋องจากการแทรกซึมของจุลินทรีย์เข้าไปในระหว่างการฆ่าเชื้อ (พาสเจอร์ไรส์) การจัดเก็บและการขนส่ง
การควบคุมอุณหภูมิอาหารกระป๋อง	การเก็บอาหารกระป๋องไว้เป็นระยะเวลาหนึ่งที่อุณหภูมิเอื้ออำนวยต่อการพัฒนาของจุลินทรีย์ในผลิตภัณฑ์
ลิ้น	กลิ้งส่วนล่างของขอเกี่ยวฝาในกระป๋องโลหะหรือทำให้ส่วนล่างของตัวล็อคท่อแบน
เขี้ยว	ตะเข็บไม่หมุนเฉพาะจุดพร้อมตะขอที่ยื่นออกมาแหลมของฝาครอบจากใต้ตะเข็บ
ตัดราคา	การตัดระนาบบนหรือล่างของรอยต่อพร้อมกับเอาจานและส่วนหนึ่งของกระป๋องออกจากระนาบของตะเข็บ
ตะเข็บปลอม	ขาดการมีส่วนร่วมของเบ็ด
ตะเข็บรีด (เปลือก)	การอัดแน่นที่ด้านล่างของตะเข็บมากเกินไปก่อนที่จะทำให้ด้านล่างของตะเข็บเรียบ

(ฉบับแก้ไข ฉบับที่ 1)

ภาคผนวก 2
อ้างอิง

ข้อบกพร่องกระป๋อง

ข้อบกพร่องในผลิตภัณฑ์กระป๋องคือ:

มองเห็นได้ด้วยตาเปล่าสัญญาณของการพัฒนาของจุลินทรีย์: การหมัก, เชื้อรา, เมือก, ฯลฯ ;

ตะกอนที่ด้านล่างของกระป๋องหรือที่ขอบของพื้นผิวของผลิตภัณฑ์ที่มีภาชนะ ("แหวน")

ความขุ่นของเฟสของเหลว

การแข็งตัวของเลือด;

เปรี้ยว;

ภายนอกไม่ใช่ลักษณะของผลิตภัณฑ์กลิ่นและ (หรือ) รสชาติ;

เปลี่ยนสี

ข้อบกพร่องในรูปลักษณ์ของภาชนะบรรจุที่มีผลิตภัณฑ์บรรจุอยู่ในนั้นได้รับการพิจารณา:

สัญญาณของการรั่วไหลที่มองเห็นได้ด้วยตาเปล่า: รู, ผ่านรอยแตก, รอยเปื้อนหรือร่องรอยของผลิตภัณฑ์ที่ไหลออกจากกระป๋อง

กระป๋องที่มีปลายสั่น

ตะเข็บกระป๋องที่ออกแบบไม่ถูกต้อง (ลิ้น, ฟัน, อันเดอร์, ตะเข็บปลอม, ตะเข็บรีด);

สนิมหลังจากการกำจัดซึ่งเปลือกยังคงอยู่

การเสียรูปของร่างกายปลายหรือรอยต่อตามยาวของกระป๋องในรูปแบบของขอบคมและ "นก";

ฝาเบ้บนขวดแก้ว, ตัดรอยหยักของฝาตามทุ่งที่รีด, วงแหวนยางที่ยื่นออกมา ("ห่วง");

รอยร้าวหรือกระจกแตกที่ตะเข็บ ฝาปิดไม่พอดีเมื่อเทียบกับคอกระป๋อง

การเสียรูป (เยื้อง) ของฝาขวดแก้วซึ่งทำให้เกิดรอยต่อตะเข็บ

นูนนูน (ปุ่ม) บนฝาครอบ

ภาคผนวก 3
อ้างอิง

การเตรียมการชกมวย

เฉพาะนักจุลชีววิทยาที่ทำการวิเคราะห์และหากจำเป็นควรมีผู้ช่วยอยู่ในกล่อง

กล่องต้องมีโต๊ะและสตูล ไม่ควรมีรายการพิเศษ ยกเว้นรายการที่จำเป็นสำหรับการวิเคราะห์อาหารกระป๋อง

บนโต๊ะควรเป็น:

เตาวิญญาณหรือเตาแก๊ส

โถที่มีจุกปิดพื้นพร้อมแอลกอฮอล์

โถปิดฝาพร้อมสำลีพันก้านที่ผ่านการฆ่าเชื้ออย่างหนาแน่นขนาด 3 ´3 ซม. หรือห่วงสำลี

ขวดที่มีน้ำยาฆ่าเชื้อ (ความสูงของชั้น 3 ซม.) สำหรับวางปิเปตหรือหลอดที่ใช้หลังจากการวิเคราะห์

ถาดโลหะหรือถาดเคลือบขนาดเล็กที่วางกระป๋องที่วิเคราะห์แล้ว

ปิเปตหรือหลอดปลอดเชื้อที่ใช้เก็บตัวอย่าง

อุปกรณ์เสริมควรเก็บไว้ในลิ้นชักของโต๊ะ: แหนบและหมัด หมัดควรมีรูปร่างเป็นหอกที่มีหน้าตัดเป็นรูปสี่เหลี่ยมขนมเปียกปูนที่มีเส้นทแยงมุม 1 ´ 1.5 ซม. หรือหน้าตัดเป็นรูปสามเหลี่ยมหน้าจั่ว

เมื่อเปิดกระป๋องจำนวนมาก จะใช้หมัดที่ติดตั้งบนขาตั้งกล้อง ในกรณีนี้การเปิดทำได้โดยการกดคันโยกบนฝาขวดโหล

ก่อนเปิดขวด หมัดจะถูกเผาด้วยเปลวไฟของไม้กวาด

กล่องจะถูกล้างและฆ่าเชื้อทันทีก่อนการวิเคราะห์ (ไม่เร็วกว่า 24 ชั่วโมงก่อนการเริ่มต้น) และหลังจากเสร็จสิ้น การฆ่าเชื้อทำได้โดยการเช็ดพื้นผิวทั้งหมดด้วยคลอรีนหรือสารฆ่าเชื้ออื่น ๆ ตามคำแนะนำที่สอดคล้องกับการเตรียมการแต่ละครั้ง 45 นาทีก่อนเริ่มงานในกล่อง เปิดหลอดฆ่าเชื้อแบคทีเรียเป็นเวลา (30 ± 5) นาที

ในปัจจุบัน ตู้ไหลแบบลามิเนต (ห้องโดยสารป้องกันอากาศบริสุทธิ์พิเศษ) ใช้สำหรับการวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยา กล่องลามิเนตผลิตโดยโรงงาน Uzhgorod ของอุปกรณ์การแพทย์ "Laminar" กล่องของแบรนด์ BPV 1200 ผลิตในฮังการีกล่องของแบรนด์ TVG-S II 1.14.1 ผลิตโดย Babcock - BSH (ประเทศเยอรมนี)

ภาคผนวก 2, 3 (แนะนำเพิ่มเติมแก้ไขครั้งที่ 1)

ข้อมูลสารสนเทศ

1. พัฒนาและแนะนำโดยคณะกรรมการอุตสาหกรรมเกษตรแห่งสหภาพโซเวียต

2. อนุมัติและแนะนำโดยพระราชกฤษฎีกาของคณะกรรมการมาตรฐานแห่งรัฐสหภาพโซเวียตหมายเลข 3810 ลงวันที่ 04.12.85

3. มาตรฐานสอดคล้องกับ ST SEV 3014-81 . อย่างเต็มที่

4. มาตรฐานสากลถูกนำมาใช้ในมาตรฐาน: ISO 6887-83 (E) และ ISO 7218-85

5. แทนที่ GOST 10444.0-75

6. ข้อบังคับอ้างอิงและเอกสารทางเทคนิค

การกำหนด NTD ที่ได้รับลิงก์	หมายเลขสินค้า
	8. EDITION (เมษายน 2010) พร้อมการแก้ไขครั้งที่ 1 ได้รับการอนุมัติในเดือนกันยายน 1989 (IUS 12-89)

7. ข้อ จำกัด ของระยะเวลาที่มีผลบังคับใช้ถูกลบออกโดยพระราชกฤษฎีกามาตรฐานแห่งสหภาพโซเวียตที่ 01.23.91 N 38

8. EDITION (เมษายน 2010) พร้อมการแก้ไขครั้งที่ 1 ได้รับการอนุมัติในเดือนกันยายน 1989 (IUS 12-89)

มาตรฐานสากลนี้ใช้กับผลิตภัณฑ์อาหารและกลิ่นรส และระบุการจัดเตรียมตัวอย่างสำหรับการวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยา

คำศัพท์ที่ใช้ในมาตรฐานและคำอธิบายมีอยู่ในภาคผนวก 1

1. อุปกรณ์ รีเอเจนต์ และวัสดุ

1.1. เมื่อเตรียมตัวอย่างสำหรับการวิเคราะห์ จะใช้อุปกรณ์ รีเอเจนต์ และวัสดุต่อไปนี้:

อ่างอาบน้ำ;

โฮโมจีไนเซอร์, เครื่องผสมในห้องปฏิบัติการหรือครกพอร์ซเลนตาม GOST 9147;

อุปกรณ์กรองเมมเบรน

เตาแก๊สหรือแอลกอฮอล์ตาม GOST 25336;

กรวยโลหะ

ต่อย;

ที่เปิดขวด;

ที่เปิดกระป๋อง;

กรรไกร, มีดผ่าตัด, แหนบตาม GOST 21241, ไม้พาย, ช้อน;

ลายฉลุ (แม่แบบ);

หลอดทดลองตาม GOST 25336;

ขวดตาม GOST 25336;

ปิเปตตาม NTD;

จุกยาง

ลูกแก้ว;

แก้ไขเอทิลแอลกอฮอล์ตาม GOST 5962*; 70%;
________________
* ในอาณาเขตของสหพันธรัฐรัสเซีย GOST R 51652-2000 มีผลบังคับใช้

ถุงพลาสติก;

ผงซักฟอก;

โซเดียมคลอไรด์ตาม GOST 4233;

เปปโตนสำหรับวัตถุประสงค์ทางแบคทีเรียตาม GOST 13805

เครื่องมือและพื้นผิวของอุปกรณ์ที่สัมผัสโดยตรงกับผลิตภัณฑ์จะต้องผ่านการฆ่าเชื้อด้วยวิธีใดวิธีหนึ่งที่ระบุใน GOST 26668

1.2. การเตรียมสารละลายเปปโตน-เกลือ

สารละลายเกลือเปปโทนเตรียมดังนี้: โซเดียมคลอไรด์ 8.5 กรัมและเปปโทน 1.0 กรัมละลายในน้ำกลั่น 1 dm ด้วยความร้อนช้า สารละลายที่ได้ หากจำเป็น จะถูกกรองผ่านตัวกรองกระดาษ ปรับเป็น pH 7.0 ± 0.1 เทลงในขวด หลอดทดลอง หรือภาชนะอื่นๆ ปิดผนึกและฆ่าเชื้อที่อุณหภูมิ (121 ± 1) ° C เป็นเวลา 30 นาที

สารละลายถูกเก็บไว้ในที่มืดที่อุณหภูมิ (4 ± 2) ° C ไม่เกิน 30 วันภายใต้สภาวะที่ไม่รวมถึงการระเหยของความชื้น

อุณหภูมิของสารละลายเปปโตน-เกลือควรสอดคล้องกับอุณหภูมิของผลิตภัณฑ์ที่วิเคราะห์

1.3. การเตรียมน้ำเปปโตน

น้ำเปปโตนถูกเตรียมในลักษณะเดียวกับสารละลายเปปโตน-น้ำเกลือโดยไม่ต้องเติมโซเดียมคลอไรด์

2. การเตรียมตัวอย่างเพื่อการวิเคราะห์

2.2. บรรจุภัณฑ์ที่มีตัวอย่างจะทำความสะอาดสิ่งปนเปื้อน หากได้รับตัวอย่างผลิตภัณฑ์ที่ปิดผนึกอย่างผนึกแน่นเพื่อการวิเคราะห์ ให้ตรวจสอบความรัดกุมของภาชนะ ความแน่นของอาหารกระป๋องถูกกำหนดตาม GOST 8756.18 ความรัดกุมของภาชนะบรรจุโพลีเมอร์กับผลิตภัณฑ์ เช่นเดียวกับอาหารกระป๋องที่ปิดฝาด้วยเมมเบรนยืดหยุ่น (ปุ่ม) - สายตา พื้นผิวของเมมเบรนยืดหยุ่นควรเว้าเข้าด้านใน ภาชนะแก้ว โลหะ หรือโพลีเมอร์ที่ปิดผนึกอย่างผนึกแน่นกับผลิตภัณฑ์ ล้างด้วยน้ำและผงซักฟอก จากนั้นล้างด้วยน้ำสะอาดและทำให้แห้ง บรรจุภัณฑ์ที่รั่วไหลของผลิตภัณฑ์ถูกเช็ดด้วยสำลีชุบเอทิลแอลกอฮอล์

อาหารกระป๋องจะถูกควบคุมอุณหภูมิทันทีก่อนการวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยา

อาหารกระป๋องมีการควบคุมอุณหภูมิ:

ปิดผนึกอย่างผนึกแน่น ปราศจากข้อบกพร่อง ออกแบบมาเพื่อตรวจสอบความปลอดเชื้อทางอุตสาหกรรมของผลิตภัณฑ์กระป๋องและความเสถียรทางจุลชีววิทยาของอาหารกระป๋อง

ด้วยปลายสั่นและแคร็กเกอร์ในภาชนะที่ปิดสนิท ออกแบบมาเพื่อระบุสาเหตุของข้อบกพร่องเหล่านี้

อาหารกระป๋องที่มีจุดประสงค์เพื่อตรวจหาสารพิษโบทูลินัม ถูกทิ้งระเบิด โดยมีสัญญาณของการเน่าเสียทางจุลชีววิทยาและเทอร์โมสแตทที่รั่วจะไม่ถูกควบคุมอุณหภูมิ

สำหรับการแสดงกิจกรรมที่สำคัญของจุลินทรีย์ mesophilic aerobic, facultative anaerobic และ anaerobic อาหารกระป๋องจะถูกควบคุมอุณหภูมิที่ 30-37 ° C ในภาชนะที่มีความจุสูงถึง 1 dm รวมเป็นเวลาอย่างน้อย 5 วันในภาชนะที่มี ความจุมากกว่า 1 dm - อย่างน้อย 7 วัน

สำหรับการแสดงกิจกรรมที่สำคัญของจุลินทรีย์เทอร์โมฟิลิกแอโรบิก, จุลินทรีย์แบบไม่ใช้ออกซิเจนและแบบไม่ใช้ออกซิเจน, อาหารกระป๋องในภาชนะที่มีความจุใด ๆ จะถูกควบคุมอุณหภูมิที่ 55-62 ° C เป็นเวลาอย่างน้อย 3 วัน ในระหว่างการควบคุมอุณหภูมิ อาหารกระป๋องจะได้รับการตรวจสอบทุกวัน อาหารกระป๋องที่มีข้อบกพร่องของภาชนะที่ประจักษ์ทันทีหลังจากการตรวจจับถูกนำออกจากเทอร์โมสตัทและเก็บไว้เป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง หลังจากนั้นจะระบุสถานะของภาชนะและหากเป็นไปได้ ให้สังเกตลักษณะที่ปรากฏของผลิตภัณฑ์ อาหารกระป๋องในภาชนะที่มีลักษณะปกติหลังจากทำความเย็นที่อุณหภูมิห้องถือว่าไม่มีข้อบกพร่องและยังคงควบคุมอุณหภูมิต่อไป

หลังจากควบคุมอุณหภูมิอาหารกระป๋องและทำให้เย็นลงเป็นเวลา 24 ชั่วโมงจนถึงอุณหภูมิห้อง ให้สังเกตสภาพของภาชนะและหากเป็นไปได้ ให้สังเกตลักษณะที่ปรากฏของผลิตภัณฑ์

ข้อบกพร่องในอาหารกระป๋องแสดงไว้ในภาคผนวก 2

2.2, 2.3. (ฉบับแก้ไข ฉบับที่ 1).

2.4. ตัวอย่างที่มีผลิตภัณฑ์แช่แข็งจะถูกละลายที่อุณหภูมิ (4 ± 2) °C ก่อนเตรียมตัวอย่าง เก็บตัวอย่างทันทีหลังจากละลาย แต่ไม่เกิน 18 ชั่วโมงหลังจากเริ่มละลาย

อนุญาตให้ละลายตัวอย่างผลิตภัณฑ์ที่อุณหภูมิ 18-20 °C เป็นเวลา 1 ชั่วโมง

ตัวอย่างของผลิตภัณฑ์ที่มีความคงตัวที่เป็นเนื้อเดียวกันอาจละลายในเทอร์โมสตัทที่ 35 °C โดยมีเงื่อนไขว่าสามารถละลายน้ำแข็งได้อย่างสมบูรณ์ภายในเวลาไม่เกิน 15 นาที

2.5. การเปิดบรรจุภัณฑ์ด้วยตัวอย่างสินค้า

2.5.2. บรรจุภัณฑ์ที่มีตัวอย่างผลิตภัณฑ์ (ยกเว้นอาหารกระป๋อง) ถูกเช็ดด้วยสำลีชุบ 70% เอทิลแอลกอฮอล์ แอลกอฮอล์ถูกเผาหรือกำจัดออกโดยการระเหยอย่างอิสระ จากนั้นเปิดบรรจุภัณฑ์ ยิงคอของขวดโลหะหรือแก้ว และนำมวล (ปริมาตร) ของผลิตภัณฑ์มาในปริมาณที่จำเป็นในการเตรียมตัวอย่างอย่างน้อยหนึ่งตัวอย่าง

2.5.3. บรรจุภัณฑ์ที่มีตัวอย่าง (ถุงที่ทำด้วยฟอยล์ วัสดุโพลีเมอร์ หรือกระดาษ) ถูกเปิดในที่ที่บำบัดด้วยไม้กวาดชุบแอลกอฮอล์ก่อนหน้านี้ การเปิดบรรจุภัณฑ์พร้อมตัวอย่างผลิตภัณฑ์จะดำเนินการในลักษณะที่ไม่รวมถึงการปนเปื้อนของผลิตภัณฑ์ วัตถุโดยรอบ และสิ่งแวดล้อม

2.5.4. ก่อนเปิดอาหารกระป๋องที่มีลักษณะปกติจะได้รับการบำบัดด้วยเอทิลแอลกอฮอล์ด้วยวิธีใดวิธีหนึ่งดังต่อไปนี้:

สำหรับขวดแก้ว ฝาจะถูกแปรรูป สำหรับกระป๋องโลหะ - ปลายตรงข้ามกับขวดที่ทำเครื่องหมายไว้

เช็ดพื้นผิวของฝาด้วยผ้าเช็ดทำความสะอาดแอลกอฮอล์ สำลีทิ้งไว้บนพื้นผิวและจุดไฟก่อนเปิดอาหารกระป๋อง

ฝาครอบยางและฝาครอบมงกุฎ เบเคไลต์และการปิดด้วยพลาสติกก็ถูกแปรรูปเช่นกัน แต่ผ้าอนามัยแบบสอดไม่ติดไฟ

ฝาครอบโลหะ (ปลาย) ขึ้นอยู่กับวัตถุประสงค์ของการวิเคราะห์เปิดหรือเจาะด้วยหมัด 1-4 ครั้งในบริเวณใกล้เคียงกับไม้กวาดที่กำลังไหม้ ขนาดของรู (เส้นผ่านศูนย์กลางหรือความยาว) ควรอยู่ที่ 1-3 ซม.

ตัวอย่างที่เลือกของผลิตภัณฑ์จะถูกหว่านในสารอาหารทันทีหรือถ่ายโอนไปยังสารละลายเปปโตน-เกลือเพื่อเตรียมการเจือจาง

ก่อนเปิดขวดหรือหลอดที่มีฝาเกลียว ให้คลายเกลียวฝาหรือบุชที่เสร็จแล้วออก ขอบขวดหรือเยื่อของหลอดถูกเผาด้วยเปลวไฟ เมมเบรนถูกเจาะด้วยมีดผ่าตัดที่ปลอดเชื้อ

ก่อนที่จะเปิดขวดที่ปิดสนิทด้วยเม็ดมะยมหรือจุกฟอยล์ ชัตเตอร์จะถูกยิงด้วยเปลวไฟของหัวเตา จุกไม้ก๊อกจะถูกลบออกด้วยกุญแจปลอดเชื้อ ขอบขวดจะถูกเผาอีกครั้งในเปลวไฟของเตา

เมื่อเปิดขวดด้วยจุกยาง จุกที่เคลือบด้วยเอทิลแอลกอฮอล์จะถูกลบออกโดยไม่ต้องทำการยิงเบื้องต้น และขอบของขวดจะถูกเผาด้วยเปลวไฟจากเตา

2.5.5. อาหารกระป๋องที่มีลักษณะชำรุดจะถูกวางบนถาดโลหะ ทันทีก่อนที่จะเก็บตัวอย่างผลิตภัณฑ์ พื้นผิวของฝา (ส่วนท้าย) จะได้รับการบำบัดตามลักษณะที่ระบุไว้ในข้อ 2.5.2 แต่เอทิลแอลกอฮอล์จะไม่จุดไฟ ฝาปิดที่ผ่านการบำบัด (หรือปลาย) ถูกปกคลุมด้วยกรวยโลหะปลอดเชื้อแบบคว่ำเพื่อให้ช่องทางครอบคลุมพื้นผิวอย่างสมบูรณ์ ผ่านช่องเปิดแคบ ๆ ของกรวยเจาะฝา (ปลาย) อย่างระมัดระวังด้วยหมัดที่ปลอดเชื้อทำให้เกิดรูเข็ม

อนุญาตให้ใช้ถุงพลาสติกแทนกรวยโลหะ หลังจากแปรรูปฝา (ส่วนปลาย) อาหารกระป๋องจะถูกใส่ในถุงพลาสติกที่เช็ดด้วยเอทิลแอลกอฮอล์ก่อนหน้านี้ เพื่อให้ก้นถุงปิดพื้นผิวที่จะเปิดออก กระเป๋าถูกมัดแน่นที่ด้านล่าง อย่างระมัดระวังด้วยแรงกดเบา ๆ ของหมัดจะทำรูพร้อมกันในฝากระป๋องและในถุงพลาสติกที่กดอย่างแน่นหนา

หลังจากที่ก๊าซและผลิตภัณฑ์หยุดหนีออกจากกระป๋องพร้อมกับผลิตภัณฑ์ ช่องทางและถุงจะถูกลบออก ฝาถูกเช็ดอีกครั้งด้วยไม้กวาดปลอดเชื้อ รูขยายด้วยหมัด และตัวอย่างของผลิตภัณฑ์จะถูกนำออกจากถังทันที กระป๋องสำหรับหว่านหรือเตรียมการเจือจาง

2.6. การสุ่มตัวอย่างและการเตรียมการเจือจางเบื้องต้น

2.6.5. ในการเตรียมการเจือจางของตัวอย่างผลิตภัณฑ์จะใช้สารละลายเปปโตน-เกลือ

อนุญาตให้เตรียมการเจือจางเริ่มต้นของผลิตภัณฑ์ที่มีสัดส่วนมวลของ NaCl มากกว่า 5% โดยใช้น้ำเปปโตน การเจือจางเบื้องต้นของเนื้อสัตว์ ปลา และผลิตภัณฑ์จากนมโดยใช้น้ำเกลือ

น้ำหนัก (ปริมาตร) ของตัวอย่างผลิตภัณฑ์ที่มีไว้สำหรับการเตรียมการเจือจางเริ่มต้นหรือโฮโมจีเนตต้องมีอย่างน้อย (10±0.1) ก./ซม.

อัตราส่วนระหว่างมวล (ปริมาตร) ของตัวอย่างผลิตภัณฑ์กับปริมาตรของสารละลายเปปโตน-เกลือสำหรับการเจือจางครั้งแรกและการเจือจางที่ตามมาคือ:

1:9 - สำหรับการเจือจาง 10 เท่า (สำหรับผลิตภัณฑ์ที่มีไขมันจำนวนมากโดยไม่มีสารลดแรงตึงผิว 1:10)

1:5 - สำหรับการเจือจาง 6 เท่า

1:3 - สำหรับการเจือจาง 4 เท่า

1:1 - สำหรับการเจือจาง 2 เท่า

หากจำเป็นต้องเจือจางตัวอย่างผลิตภัณฑ์ที่มีไขมันจำนวนมาก อนุญาตให้ใช้สารลดแรงตึงผิว (โซเดียมไบคาร์บอเนต ฯลฯ) ที่ไม่มีฤทธิ์ต้านจุลชีพ

ในการเตรียมการเจือจางของผลิตภัณฑ์ตัวอย่างที่มีแรงดันออสโมติกสูง อนุญาตให้ใช้เปปโตนหรือน้ำกลั่น

(ฉบับแก้ไข ฉบับที่ 1).

2.6.6. การเจือจางเบื้องต้นของตัวอย่างผลิตภัณฑ์จัดทำขึ้นภายใต้สภาวะปลอดเชื้อด้วยวิธีใดวิธีหนึ่งดังต่อไปนี้:

การละลายของผลิตภัณฑ์

การเจือจางของผลิตภัณฑ์ที่มีเฟสของเหลว

สารแขวนลอยของผง ผลิตภัณฑ์จากแป้งเปียก และพื้นผิวของชิ้นผลิตภัณฑ์ที่ปนเปื้อนจุลินทรีย์

การทำให้เป็นเนื้อเดียวกันของผลิตภัณฑ์ที่เป็นของแข็ง

2.6.7. ตัวอย่างของผลิตภัณฑ์ที่เป็นของเหลวและหนืดจะถูกถ่ายด้วยปิเปตที่ปราศจากเชื้อโดยใช้ปลั๊กแบบฝ้ายโดยการใส่ปิเปตเข้าไปในส่วนลึกของผลิตภัณฑ์

ส่วนของผลิตภัณฑ์ที่เหลืออยู่บนพื้นผิวของปิเปตสามารถระบายไปที่ปลายปิเปตได้ ผลลัพธ์ที่ได้จะถูกลบออกโดยการสัมผัสผนังด้านในของจานหรือภาชนะสำหรับผู้บริโภคเหนือพื้นผิวของผลิตภัณฑ์

ผลิตภัณฑ์ที่มีความหนืดจะถูกลบออกจากพื้นผิวของปิเปตด้วยผ้าเช็ดทำความสะอาด

ส่วนหนึ่งของผลิตภัณฑ์จะถูกถ่ายโอนไปยังภาชนะที่มีสารละลายเปปโตน-น้ำเกลือเพื่อเตรียมการเจือจางเบื้องต้น เพื่อไม่ให้ปิเปตสัมผัสกับพื้นผิวของสารละลายเปปโตน-น้ำเกลือ ด้วยปิเปตที่ปราศจากเชื้ออื่น ให้ผสมผลิตภัณฑ์กับสารละลายเปปโตน-เกลือให้ละเอียดโดยเติมสิบเท่าและขับส่วนผสมออก

เมื่อทำงานกับผลิตภัณฑ์ที่มีความหนืด แนะนำให้วางลูกบอลแก้วหลายลูกในภาชนะเพื่อให้ผสมกับสารละลายเปปโตน-เกลือได้เร็วขึ้น

2.6.8. ผลิตภัณฑ์ของเหลวที่อิ่มตัวด้วยคาร์บอนไดออกไซด์ (CO) จะถูกถ่ายโอนไปยังขวดทรงกรวยที่ปิดด้วยผ้าฝ้ายหรือปลอดเชื้อและให้ความร้อนด้วยการกวนบ่อย ๆ เป็นวงกลมในอ่างน้ำที่อุณหภูมิ 30 ถึง 37 ° C จนกระทั่งหยุดแก๊ส ฟองสบู่ถูกปล่อยออกมา

ตัวอย่างของผลิตภัณฑ์ถูกนำและประมวลผลตามข้อ 2.6.7

2.6.9. ตัวอย่างของผลิตภัณฑ์ที่เป็นผงหรือเป็นกลุ่มให้ใช้ช้อนหรือไม้พายปลอดเชื้อจากที่ต่างๆ ของผลิตภัณฑ์ (หากจำเป็น ให้เอาชั้นบนสุดของผลิตภัณฑ์ 2 ซม. ออกด้วยช้อนที่ปราศจากเชื้อก่อนทำการสุ่มตัวอย่าง) จากนั้นตัวอย่างจะถูกถ่ายโอนไปยัง ภาชนะปลอดเชื้อที่ชั่งน้ำหนักล่วงหน้าพร้อมฝาชั่งน้ำหนัก เติมสารละลายเปปโตน-เกลือลงในตัวอย่างในปริมาณที่จำเป็นเพื่อเตรียมการเจือจางเบื้องต้น กวนหรือเขย่าส่วนผสม 25 ครั้งในลักษณะเป็นวงกลมโดยมีรัศมี 30 ซม. จนได้ความสม่ำเสมอของผลิตภัณฑ์ที่เป็นเนื้อเดียวกัน

หากผลิตภัณฑ์ผงไม่ละลายในน้ำหลังจากผสมกับสารละลายเปปโตน - เกลือแล้วสารแขวนลอยที่ได้จะได้รับอนุญาตให้ยืนเป็นเวลา 10 นาทีและเขย่าอีกครั้งอย่างแรงเป็นเวลา 1 นาที

2.6.10. ส่วนหนึ่งของตัวอย่างของผลิตภัณฑ์ที่บวมน้ำได้จะถูกนำไปและการเตรียมการเจือจางเบื้องต้นนั้นจัดทำขึ้นตามข้อกำหนดของเอกสารด้านกฎระเบียบและทางเทคนิคสำหรับผลิตภัณฑ์บางประเภท

2.6.11. ตัวอย่างของผลิตภัณฑ์ที่ละลายน้ำได้โดยใช้ไม้พายหรือช้อน หลังจากบด บด หรือถูภายใต้สภาวะปลอดเชื้อ แล้วดำเนินการตามข้อ 2.6.9

ตัวอย่างจากตัวอย่างผลิตภัณฑ์ของแข็งที่ไม่ละลายน้ำจะถูกทำให้เป็นเนื้อเดียวกันในกรณีที่ระบุไว้ในเอกสารด้านกฎระเบียบและทางเทคนิค เมื่อทำให้ผลิตภัณฑ์เป็นเนื้อเดียวกันจำนวนรอบการหมุนของโฮโมจีไนเซอร์ควรเป็น 15-20 พันรอบ จำนวนรอบของโฮโมจีไนเซอร์ไม่ควรน้อยกว่า 8000 และมากกว่า 45,000 รอบต่อนาที

หากได้มวลที่ต่างกันในระหว่างการทำให้เป็นเนื้อเดียวกันของผลิตภัณฑ์ ให้จับตัวกันเป็นเวลา 15 นาที และของเหลวเหนือตะกอนจะถูกใช้สำหรับการฉีดวัคซีนและ (หรือ) การเตรียมการเจือจาง

อนุญาตให้ทำให้ผลิตภัณฑ์ที่ไม่ผ่านการฆ่าเชื้อเป็นเนื้อเดียวกันได้โดยการบดจนกว่าจะได้ความสม่ำเสมอที่เป็นเนื้อเดียวกันในครกที่ปลอดเชื้อภายใต้สภาวะปลอดเชื้อ

(ฉบับแก้ไข ฉบับที่ 1).

2.6.12. ตัวอย่างของผลิตภัณฑ์แป้งเปียกจะนำมาหลังจากผสมกับช้อนหรือแท่งแก้วอย่างทั่วถึงและดำเนินการต่อไปตามข้อ 2.6.9

2.6.13. ตัวอย่างไขมันเหลวจะถูกถ่ายด้วยปิเปตที่อบอุ่นซึ่งให้ความร้อนโดยการจุดไฟ หลังจากเติมผลิตภัณฑ์ลงในปิเปตแล้ว ส่วนที่เหลือจะถูกลบออกจากพื้นผิวของปิเปตด้วยผ้าเช็ดทำความสะอาด

ผลิตภัณฑ์จากปิเปตถูกนำเข้าสู่ภาชนะที่มีจุกแก้วที่บดแล้วและเจือจางด้วยสารละลายเกลือเปปโตนในปริมาณที่ต้องการซึ่งให้ความร้อนถึง 40-45 ° C เมื่อตรวจพบจุลินทรีย์โรคจิต อุณหภูมิไม่ควรเกิน 37 °C คราบไขมันที่เกาะติดกับปิเปตจะถูกชะล้างด้วยสารละลายเปปโตน-เกลือ ซึ่งถูกดูดหลายครั้งและปล่อยออกจากปิเปต

2.6.14. จะมีการเก็บตัวอย่างไขมันหลังจากตัดผลิตภัณฑ์ด้วยมีดหรือลวดเป็นหลายส่วน หากจำเป็น ให้เอาชั้นบนสุดออก

ตัวอย่างของผลิตภัณฑ์ถูกนำมาจากพื้นผิวของบาดแผลจากที่ต่าง ๆ ด้วยมีดผ่าตัดและถ่ายโอนไปยังจานชั่งน้ำหนักที่มีฝาปิด

ตัวอย่างจำนวนหนึ่งจะถูกถ่ายโอนไปยังจานปากกว้างที่มีจุกแก้วแบบพื้น ส่วนที่เหลือของไขมันที่เกาะติดกับผนังของจานจะถูกล้างในจานเดียวกันด้วยสารละลายเปปโตนและเกลือในปริมาณที่ร้อนถึง 40-45 ° C ซึ่งจะถูกเติมลงในจานในปริมาณที่จำเป็นเพื่อให้ได้การเจือจางเริ่มต้น

จากไขมันที่เป็นของแข็ง สามารถเลือกตัวอย่างตามปริมาตรได้ ไขมันละลายในจานคอกว้างในอ่างน้ำที่อุณหภูมิไม่เกิน 45 ° C เมื่อตรวจพบจุลินทรีย์โรคจิต อุณหภูมิไม่ควรเกิน 37 °C

หลังจากผสมไขมันที่ละลายแล้ว ไขมันจะถูกถ่ายด้วยปิเปตอุ่นๆ ลงในจานคอกว้างที่มีฝาแก้วบดซึ่งมีสารละลายเปปโตน-เกลือในปริมาณที่ต้องการเพื่อเตรียมการเจือจางเบื้องต้น สารละลายเกลือเปปโทนถูกอุ่นที่อุณหภูมิ 40-45 °C; เมื่อตรวจพบจุลินทรีย์โรคจิตถึง 37 °C

2.6.15. ตัวอย่างจากตัวอย่างผลิตภัณฑ์วิปปิ้งหรือความเหนียวข้นที่มีไขมันจำนวนมากหลังจากผสมกับแท่งแก้วแล้วนำช้อนลงในจานชั่งน้ำหนักและเติมสารละลายเปปโตน - เกลือให้ความร้อนที่อุณหภูมิ 40-45 ° C ในปริมาณที่จำเป็นในการเตรียมการเจือจางเบื้องต้น

2.6.16. การหาค่าการปนเปื้อนของจุลินทรีย์บนพื้นผิวของตัวอย่างผลิตภัณฑ์ทำได้โดยการล้างด้วยสำลีก้าน

สำลีก้านที่ผ่านการฆ่าเชื้อแล้วชุบด้วยสารละลายเปปโตน-เกลือ และเช็ดด้วยจุดต่างๆ บนพื้นผิวของชิ้นส่วนต่างๆ ของผลิตภัณฑ์ที่วิเคราะห์โดยมีพื้นที่รวม 100 cm2

พื้นที่ผิวที่จะวิเคราะห์วัดโดยใช้แม่แบบปลอดเชื้อที่มีรูขนาดที่เหมาะสม

ไม้กวาดถูกวางในหลอดทดลองที่มีสารละลายเปปโตน-เกลือ 10 มล. เนื้อหาของหลอดจะถูกผสมอย่างทั่วถึงกับปิเปต สารแขวนลอยที่เกิดขึ้นถือเป็นการเจือจางดั้งเดิม

(ฉบับแก้ไข ฉบับที่ 1).

2.7. การเตรียมการเจือจางสิบเท่า

2.7.1. การเจือจางสิบเท่าครั้งแรกของตัวอย่างเป็นการเจือจางครั้งแรก การเจือจางเริ่มต้นถูกจัดทำขึ้นตามข้อ 2.6 การเจือจางที่ตามมาจะได้มาจากมัน

2.7.2. การเจือจางครั้งที่สองที่ตามมานั้นเตรียมจากส่วนหนึ่งของการเจือจางดั้งเดิมและเก้าส่วนของสารละลายเปปโตน-น้ำเกลือโดยการผสมในหลอดทดลอง

หากใช้ปิเปตเพื่อผสมการเจือจางเริ่มต้น จะใช้ปิเปตเดียวกันเพื่อเพิ่มการเจือจางเริ่มต้น 1 ซม. ลงในสารละลายเปปโตน-เกลือ 9 ซม. โดยไม่ต้องสัมผัสพื้นผิวของสารละลายด้วยปิเปต การเจือจางผสมกับปิเปตอื่นโดยการดูดและเป่าเนื้อหาของหลอดออกสิบครั้ง

ภาคผนวก 1 (ข้อมูล) คำศัพท์ที่ใช้ในมาตรฐานและคำอธิบาย

เอกสารแนบ 1
อ้างอิง


ภาคเรียน	คำอธิบาย
บานพับ	ส่วนหนึ่งของตัวอย่างของมวล ปริมาตร ที่มุ่งหมายสำหรับการเตรียมโฮโมจีเนต การเจือจางเบื้องต้น หรือการฉีดเชื้อโดยตรงไปยังอาหารเลี้ยงเชื้อ
การผสมพันธุ์เบื้องต้น	ตัวอย่างของผลิตภัณฑ์ที่เจือจางด้วยสารละลายตามความเข้มข้นที่ต้องการ ซึ่งอาจเป็นการเจือจางสอง (2) สี่ (4) หก (6) และบ่อยครั้งกว่านั้นสิบ (10)
ความคงตัวทางจุลชีววิทยาของอาหารกระป๋อง	การปฏิบัติตามตัวชี้วัดคุณภาพของอาหารกระป๋องตามข้อกำหนดที่กำหนดโดยเอกสารด้านกฎระเบียบและทางเทคนิคสำหรับผลิตภัณฑ์ประเภทนี้ในแง่ของตัวชี้วัดทางจุลชีววิทยา
อาหารกระป๋องเต็มรูปแบบ	อาหารกระป๋อง ความคงตัวทางจุลชีววิทยาที่ไม่ขึ้นกับระยะเวลาการเก็บรักษาที่อุณหภูมิที่กำหนดไว้สำหรับผลิตภัณฑ์ประเภทนี้ในเอกสารด้านกฎระเบียบและทางเทคนิค
อุตสาหกรรมอาหารกระป๋องปลอดเชื้อ	ไม่มีผลิตภัณฑ์กระป๋องของจุลินทรีย์ที่สามารถพัฒนาได้ที่อุณหภูมิการเก็บรักษาที่กำหนดไว้สำหรับอาหารกระป๋องประเภทนี้ และของจุลินทรีย์และสารพิษจากจุลินทรีย์ที่เป็นอันตรายต่อสุขภาพของมนุษย์
ลักษณะปกติของอาหารกระป๋อง (ด้วยการประเมินคุณภาพทางจุลชีววิทยา)	อาหารกระป๋องที่ไม่มีข้อบกพร่องในด้านบรรจุภัณฑ์ การปิด และผลิตภัณฑ์กระป๋อง
ข้อบกพร่องของอาหารกระป๋อง	ความแตกต่างของแต่ละบุคคลระหว่างลักษณะของอาหารกระป๋อง สถานะของบรรจุภัณฑ์หรือการปิด หรือคุณภาพของผลิตภัณฑ์กระป๋องตามข้อกำหนดของเอกสารด้านกฎระเบียบและทางเทคนิค
อาหารกระป๋องแบบมีปลายสั่น	อาหารกระป๋องในภาชนะที่ปลายด้านหนึ่งงอเมื่อกดกับปลายอีกด้าน แต่หลังจากความดันหยุดลงจะกลับสู่สภาพเดิมเช่นเดียวกับอาหารกระป๋องในภาชนะที่บวมอันเป็นผลมาจากการละเมิด ระบอบอุณหภูมิของการจัดเก็บ แต่ได้มาซึ่งลักษณะปกติที่อุณหภูมิห้อง
โคลพุชา	อาหารกระป๋องในภาชนะที่มีก้น (ฝา) บวมอย่างต่อเนื่องเพื่อให้ได้ตำแหน่งปกติ (ในกรณีนี้ปลายอีกด้านจะฟู) หลังจากถอดความดันออก ก้น (ฝา) จะกลับสู่สถานะบวมก่อนหน้า
อาหารกระป๋องระเบิด	อาหารกระป๋องในภาชนะที่บวมซึ่งไม่สามารถมีลักษณะปกติได้
การปิดผนึกอาหารกระป๋องอย่างแน่นหนา	สถานะของบรรจุภัณฑ์และการปิดฝา ซึ่งรับประกันการปกป้องอาหารกระป๋องจากการแทรกซึมของจุลินทรีย์เข้าไปในระหว่างการฆ่าเชื้อ (พาสเจอร์ไรส์) การจัดเก็บและการขนส่ง
การควบคุมอุณหภูมิอาหารกระป๋อง	การเก็บอาหารกระป๋องไว้เป็นระยะเวลาหนึ่งที่อุณหภูมิเอื้ออำนวยต่อการพัฒนาของจุลินทรีย์ในผลิตภัณฑ์
	กลิ้งส่วนล่างของขอเกี่ยวฝาในกระป๋องโลหะหรือทำให้ส่วนล่างของตัวล็อคท่อแบน
	ตะเข็บไม่หมุนเฉพาะจุดพร้อมตะขอที่ยื่นออกมาแหลมของฝาครอบจากใต้ตะเข็บ
	การตัดระนาบบนหรือล่างของรอยต่อพร้อมกับเอาจานและส่วนหนึ่งของกระป๋องออกจากระนาบของตะเข็บ
ตะเข็บปลอม	ขาดการมีส่วนร่วมของเบ็ด
ตะเข็บรีด (เปลือก)	การอัดแน่นที่ด้านล่างของตะเข็บมากเกินไปก่อนที่จะทำให้ด้านล่างของตะเข็บเรียบ

(ฉบับแก้ไข ฉบับที่ 1).

ภาคผนวก 2 (ข้อมูล) ข้อบกพร่องกระป๋อง

ภาคผนวก 2
อ้างอิง

ข้อบกพร่องในผลิตภัณฑ์กระป๋องคือ:

มองเห็นได้ด้วยตาเปล่าสัญญาณของการพัฒนาของจุลินทรีย์: การหมัก, เชื้อรา, เมือก, ฯลฯ ;

ตะกอนที่ด้านล่างของกระป๋องหรือที่ขอบของพื้นผิวของผลิตภัณฑ์ที่มีภาชนะ ("แหวน");

ความขุ่นของเฟสของเหลว

การแข็งตัวของเลือด;

เปรี้ยว;

ภายนอกไม่ใช่ลักษณะของผลิตภัณฑ์กลิ่นและ (หรือ) รสชาติ;

เปลี่ยนสี

ข้อบกพร่องในรูปลักษณ์ของภาชนะบรรจุที่มีผลิตภัณฑ์บรรจุอยู่ในนั้นได้รับการพิจารณา:

สัญญาณของการรั่วไหลที่มองเห็นได้ด้วยตาเปล่า: รู, ผ่านรอยแตก, รอยเปื้อนหรือร่องรอยของผลิตภัณฑ์ที่ไหลออกจากกระป๋อง

ระเบิด;

แครกเกอร์;

กระป๋องที่มีปลายสั่น

ตะเข็บกระป๋องที่ออกแบบไม่ถูกต้อง (ลิ้น, ฟัน, อันเดอร์, ตะเข็บปลอม, ตะเข็บรีด);

สนิมหลังจากการกำจัดซึ่งเปลือกยังคงอยู่

การเสียรูปของร่างกายปลายหรือรอยต่อตามยาวของกระป๋องในรูปแบบของขอบคมและ "นก";

ฝาเบ้บนขวดแก้ว, ตัดรอยหยักของฝาปิดตามทุ่งรีด, วงแหวนยางที่ยื่นออกมา ("ลูป");

รอยร้าวหรือกระจกแตกที่ตะเข็บ ฝาปิดไม่พอดีเมื่อเทียบกับคอกระป๋อง

การเสียรูป (เยื้อง) ของฝาขวดแก้วซึ่งทำให้เกิดรอยต่อตะเข็บ

นูนนูน (ปุ่ม) บนฝาครอบ

ภาคผนวก 3 (ข้อมูล) การเตรียมการชกมวย

ภาคผนวก 3
อ้างอิง

อาหารกระป๋องถูกเปิดในห้องกล่องที่ดัดแปลงเป็นพิเศษสำหรับการวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยา ในกล่องไม่ควรมีพื้นผิวที่ไม่สามารถเข้าถึงได้สำหรับการฆ่าเชื้อแบบเปียกและควรแยกการเคลื่อนไหวของอากาศที่สร้างขึ้นโดยร่างจดหมาย ผนัง พื้นและเพดานต้องปูด้วยวัสดุหรือทาสีด้วยน้ำยาฆ่าเชื้อที่ทนต่อการเปียกน้ำ สำหรับการฆ่าเชื้อด้วยอากาศ ตัวกล่องจะติดตั้งหลอดอัลตราไวโอเลตในอัตรา 1.5-2.5 W ต่อ 1 ม.

เฉพาะนักจุลชีววิทยาที่ทำการวิเคราะห์และหากจำเป็นควรมีผู้ช่วยอยู่ในกล่อง

กล่องต้องมีโต๊ะและสตูล ไม่ควรมีรายการพิเศษ ยกเว้นรายการที่จำเป็นสำหรับการวิเคราะห์อาหารกระป๋อง

บนโต๊ะควรเป็น:

เตาวิญญาณหรือเตาแก๊ส

โถที่มีจุกปิดพื้นพร้อมแอลกอฮอล์

โถปิดฝาพร้อมสำลีพันก้านที่ผ่านการฆ่าเชื้ออย่างหนาแน่นขนาด 3x3 ซม. หรือแหวนฝ้าย

ขวดที่มีน้ำยาฆ่าเชื้อ (ความสูงของชั้น 3 ซม.) สำหรับวางปิเปตหรือหลอดที่ใช้หลังจากการวิเคราะห์

ถาดโลหะหรือถาดเคลือบขนาดเล็กที่วางกระป๋องที่วิเคราะห์แล้ว

ปิเปตหรือหลอดปลอดเชื้อที่ใช้เก็บตัวอย่าง

อุปกรณ์เสริมควรเก็บไว้ในลิ้นชักของโต๊ะ: แหนบและหมัด หมัดควรมีรูปร่างเป็นหอกที่มีหน้าตัดเป็นรูปสี่เหลี่ยมขนมเปียกปูนที่มีเส้นทแยงมุม 1x1.5 ซม. หรือหน้าตัดเป็นรูปสามเหลี่ยมหน้าจั่ว

เมื่อเปิดกระป๋องจำนวนมาก จะใช้หมัดที่ติดตั้งบนขาตั้งกล้อง ในกรณีนี้การเปิดทำได้โดยการกดคันโยกบนฝาขวดโหล

ก่อนเปิดขวด หมัดจะถูกเผาด้วยเปลวไฟของไม้กวาด

กล่องจะถูกล้างและฆ่าเชื้อทันทีก่อนการวิเคราะห์ (ไม่เร็วกว่า 24 ชั่วโมงก่อนการเริ่มต้น) และหลังจากเสร็จสิ้น การฆ่าเชื้อทำได้โดยการเช็ดพื้นผิวทั้งหมดด้วยคลอรีนหรือสารฆ่าเชื้ออื่น ๆ ตามคำแนะนำที่สอดคล้องกับการเตรียมการแต่ละครั้ง 45 นาทีก่อนเริ่มทำงานในกล่องเป็นเวลา (30 ± 5) นาที เปิดหลอดฆ่าเชื้อแบคทีเรีย

ในปัจจุบัน ตู้ไหลแบบลามิเนต (ห้องโดยสารป้องกันอากาศบริสุทธิ์พิเศษ) ใช้สำหรับการวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยา กล่องลามิเนตผลิตโดยโรงงาน Uzhgorod ของอุปกรณ์การแพทย์ "Laminar" กล่องของแบรนด์ BPV 1200 ผลิตในฮังการีกล่องของแบรนด์ TVG-S II 1.14.1 ผลิตโดย Babcock - BSH (ประเทศเยอรมนี)

ภาคผนวก 2, 3. (แนะนำเพิ่มเติม รายได้ N 1)

ข้อความอิเล็กทรอนิกส์ของเอกสาร
จัดทำโดย Kodeks JSC และตรวจสอบกับ:
สิ่งพิมพ์อย่างเป็นทางการ
ผลิตภัณฑ์อาหาร อาหารกระป๋อง
วิธีการวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยา:

นั่ง. GOST - ม.: Standartinform, 2010

การเลือกตัวอย่างเฉลี่ยเมื่อวิเคราะห์ชุดผลิตภัณฑ์ จะมีการเตรียมตัวอย่างโดยเฉลี่ย สำหรับผลิตภัณฑ์อาหารต่างๆ จะมีการกำหนดบรรทัดฐานของตัวอย่างเฉลี่ยที่เลือกและกฎสำหรับการเลือก อย่างไรก็ตาม ในทุกกรณี จำเป็นต้องปฏิบัติตามเงื่อนไขที่ไม่รวมการปนเปื้อนของผลิตภัณฑ์ทดสอบที่มีจุลินทรีย์แปลกปลอม

ในการศึกษาผลิตภัณฑ์ของเหลวและกึ่งของเหลว (นม ครีมเปรี้ยว ซอส ฯลฯ) ให้ผสมให้เข้ากันแล้วจึงตักใส่ถ้วยฆ่าเชื้อขนาด 50-100 ซม. 3 ลงในจานฆ่าเชื้อ ตัวอย่างของผลิตภัณฑ์ที่มีความหนาแน่นสูง (เนื้อสัตว์ ไส้กรอก ปลา ผลิตภัณฑ์ทำอาหาร ฯลฯ) นำมาจากความหนาของผลิตภัณฑ์ในที่ต่างๆ ก่อนหน้านี้ พื้นผิวของพื้นที่ที่ทำการศึกษานั้นถูกกัดกร่อนด้วยมีดร้อนและทำการกรีดลึกพร้อมกับมีดผ่าตัดที่ปลอดเชื้อ ขอบของแผลถูกเคลื่อนออกจากกันด้วยแหนบที่ปลอดเชื้อ และผลิตภัณฑ์ชิ้นเล็ก ๆ จะถูกตัดออกด้วยกรรไกรที่ผ่านการฆ่าเชื้อแล้ว ตัวอย่างที่เลือกด้วยวิธีนี้จากสถานที่ต่างๆ จะถูกบด รวบรวมในภาชนะปลอดเชื้อ และประกอบด้วยตัวอย่างโดยเฉลี่ย

เมื่อใช้ตัวอย่างผลิตภัณฑ์โดยเฉลี่ย เช่น เนย คอทเทจชีส ชีส จะใช้หัววัดที่ปราศจากเชื้อ ซึ่งสอดเข้าไปในผลิตภัณฑ์จากปลายด้านหนึ่งแล้วนำไปที่ฝั่งตรงข้ามอย่างลึกและเฉียง จากนั้นด้วยมีดผ่าตัดที่ปลอดเชื้อ ชิ้นส่วนต่างๆ จะถูกนำออกจากตัวอย่างหลายๆ ตำแหน่งตามความยาวของโพรบ บดและใส่ในจานปลอดเชื้อ

การเตรียมตัวอย่างสำหรับการวิเคราะห์เมื่อตรวจสอบผลิตภัณฑ์ที่มีความหนาแน่นสูง ให้นำตัวอย่างขนาด 1-10 กรัมจากตัวอย่างโดยเฉลี่ย ย้ายไปยังครกที่ปราศจากเชื้อและบดให้ละเอียด หากผลิตภัณฑ์มีความหนาแน่นมากแสดงว่ามีทรายควอทซ์ที่อุ่นไว้ ผลิตภัณฑ์ที่โขลกจะถูกเติมลงในขวดที่มีน้ำเกลือปลอดเชื้อ 99 หรือ 90 ซม. 3 (สารละลายโซเดียมคลอไรด์ 0.85%) เนื้อหาของขวดถูกเขย่าเบา ๆ เป็นเวลา 5 นาที การเจือจางครั้งแรกของผลิตภัณฑ์ (1:10) จะได้รับในขวดซึ่งเตรียมการเจือจางที่ตามมา

เนยส่วนหนึ่งละลายในอ่างน้ำที่อุณหภูมิไม่เกิน 45º C หลังจากนั้น 1 ซม. 3 ของผลิตภัณฑ์จะถูกเติมด้วยปิเปตปลอดเชื้อในน้ำเกลือ 9 ซม. 3 เจือจาง 1:10

เพื่อศึกษาผลิตภัณฑ์ของเหลวและกึ่งของเหลวจากตัวอย่างโดยเฉลี่ย หลังจากผสมอย่างทั่วถึงแล้ว 1 ซม. 3 จะถูกถ่ายด้วยปิเปตปลอดเชื้อและวางในหลอดทดลองที่มีน้ำเกลือปลอดเชื้อ 9 ซม. 3

การเตรียมการเจือจางผลิตภัณฑ์อาหารอาจมีจุลินทรีย์จำนวนมาก ดังนั้น เพื่อให้ได้โคโลนีที่แยกออกมา จำเป็นต้องเตรียมผลิตภัณฑ์เจือจางสิบเท่า ในการเตรียมการเจือจาง ให้เทน้ำประปาปลอดเชื้อหรือน้ำเกลือลงในหลอดทดลองแห้งปลอดเชื้อขนาด 9 ซม. 3 หลอดพร้อมจุกปิด

การเจือจางครั้งแรกของผลิตภัณฑ์ที่ได้นั้นจะถูกผสมอย่างทั่วถึงกับปิเปตที่ปราศจากเชื้อใหม่ นำเข้าและปล่อยสารแขวนลอยที่เป็นผลออกมา ขั้นตอนนี้ดำเนินการ 3-5 ครั้ง จากนั้นใช้ปิเปตเดียวกัน 1 ซม. 3 ของสารแขวนลอย และย้ายไปยังหลอดทดลองที่สองด้วยน้ำเกลือปลอดเชื้อ 9 ซม. 3 รับการเจือจางที่สอง (1:100) ปิเปตต้องไม่จุ่มลงในของเหลวเพื่อหลีกเลี่ยงการชะล้างจุลินทรีย์ออกจากพื้นผิวด้านนอก ผสมเนื้อหาของการเจือจางครั้งที่สองอย่างละเอียดด้วยปิเปตปลอดเชื้อใหม่ รวบรวม 1 ซม. 3 และถ่ายโอนไปยังหลอดทดลองถัดไปด้วยน้ำปราศจากเชื้อ 9 ซม. 3 เพื่อให้ได้การเจือจางครั้งที่สาม (1:1000) การเจือจางที่ตามมาจะถูกเตรียมในลักษณะเดียวกันจนกว่าจะได้ค่าที่ต้องการ ควรใช้ปิเปตปลอดเชื้อแยกต่างหากเพื่อเตรียมการเจือจางแต่ละครั้ง

การเพาะในจานเพาะเชื้อในการตรวจสอบ QMAFAnM จะใช้วิธีการเพาะลึกบนอาหารเลี้ยงเชื้อที่มีความหนาแน่นสูง รูปแบบการหว่านจะแสดงในรูปที่ 3

ด้วยปิเปตที่ปราศจากเชื้อ 1 ซม. 3 ของการเจือจางที่เหมาะสมของสารแขวนลอยจะถูกนำออกจากหลอดทดลองและถ่ายโอนไปยังจานเพาะเชื้อที่ว่างเปล่า 2-3 ชิ้น 15 นาทีหลังจากการเจือจางสารแขวนลอย ถ้วยจะถูกเทด้วยสารอาหาร เมื่อต้องการทำเช่นนี้ เหนือเปลวไฟของตะเกียงแอลกอฮอล์ จุกจะถูกลบออกจากหลอดทดลองหรือขวดที่มีสารอาหารละลายและทำให้เย็นลงถึง 45-50 ° C และขอบถูกเผา จากนั้นเปิดฝาถ้วยเพื่อให้เฉพาะคอขวดเข้าไปและเทอย่างระมัดระวังใน 10-15 ซม. 3 PS ความหนาของชั้นควรประมาณ 5 มม. ฝาปิดถ้วยปิดและหมุนถ้วยทันทีโดยหมุนเบาๆ สารอาหารจะผสมกับหัวเชื้อ หลังจากนั้นทิ้งไว้ในแนวนอนประมาณ 10-15 นาทีเพื่อทำให้อาหารแข็งตัว ถ้วยที่เพาะแล้วคว่ำและวางในเทอร์โมสตัทที่อุณหภูมิ 37 ± 1 ° C เป็นเวลา 24-48 ชั่วโมง

นับอาณานิคมที่โตแล้วหลังจากการฟักไข่ จานที่เติบโต 30 ถึง 300 โคโลนีจะถูกเลือกและนับด้วยสายตาหรือใช้เครื่องนับโคโลนีแบบพิเศษ เมื่อนับโคโลนี จานจะถูกมองในแสงที่ส่องผ่าน และโคโลนีที่นับจะถูกทำเครื่องหมายด้วยหมึกหรือหมึก จำนวนจุลินทรีย์ใน 1 ซม. 3 (หรือ 1 กรัม) ของผลิตภัณฑ์ (QMAFAnM) ถูกกำหนดเป็นผลคูณของจำนวนโคโลนีที่ปลูก (N) โดยดัชนีการเจือจาง (n):

QMAFAnM \u003d N 10 n CFU / cm 3

จุลินทรีย์แบบไม่ใช้ออกซิเจนไม่ได้ถูกกำหนดโดยวิธีเพลท เนื่องจากต้องสร้างสภาวะที่ไม่ใช้ออกซิเจนเพื่อการเพาะปลูก การปลูกแบบไม่ใช้ออกซิเจนจะดำเนินการในสภาวะไร้อากาศ

การเตรียมตัวอย่างสำหรับการวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยา การเก็บตัวอย่างน้ำเพื่อการวิจัยทางจุลชีววิทยา

การสุ่มตัวอย่างเพื่อการวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยา

การเตรียมตัวอย่างสำหรับการวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยา

การเพาะด้วยแผ่นกรองเมมเบรน

การกำหนดจำนวนจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และ facultative

1. อุปกรณ์ รีเอเจนต์ และวัสดุ

2. การเตรียมตัวอย่างเพื่อการวิเคราะห์

เอกสารแนบ 1 อ้างอิง

ภาคผนวก 2 อ้างอิง

ภาคผนวก 3 อ้างอิง

2. การเตรียมตัวอย่างเพื่อการวิเคราะห์

ภาคผนวก 1 (ข้อมูล) คำศัพท์ที่ใช้ในมาตรฐานและคำอธิบาย

ภาคผนวก 2 (ข้อมูล) ข้อบกพร่องกระป๋อง

ภาคผนวก 3 (ข้อมูล) การเตรียมการชกมวย

เอกสารแนบ 1
อ้างอิง

ภาคผนวก 2
อ้างอิง

ภาคผนวก 3
อ้างอิง